Бак посев полости рта

Обновлено: 05.10.2024

Сбор материала для культуральных исследований и микроскопии необходимо проводить до назначения специфической противомикробной терапии. Несоблюдение данного условия может привести к ложноотрицательному результату исследования. материал берут натощак или через 3-4 ч после еды. Для более полного открытия глоточного отверстия рекомендуется по время забора материала надавливать шпателем на корень языка. Важно, чтобы при извлечении тампона он не касался зубов, щек, языка. Для сбора мазков из носоглотки и ротоглотки используются стерильные зонды, которые после сбора материала погружают в контейнеры с транспортной средой, обеспечивающей стабильность и сохранение ростовых свойств микроорганизмов. Тип зондов, состав транспортных сред, методику сбора, а также условия хранения и транспортирования клинического материала следует уточнить в инструкции к используемым реагентам.

Хранение образцов

  • Для культуральных исследований и микроскопии – при температуре 2–8°С не более 24 ч.
  • Для выявления РНК/ДНК:
  • при температуре 2–8°С – в течение 3 сут.;
  • при температуре минус 16–20°С – до 3 мес.;
  • длительно при температуре не выше минус 68°С.

Допускается лишь однократное замораживание–оттаивание материала.

Мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки для выявления РНК/ДНК – рекомендуется совмещать мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки в одной пробирке. Для этого сначала берут мазки разными зондами со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки, при этом рабочие концы зондов после взятия мазков у пациента помещаются в одну пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков, и исследуются как один образец. Материал берется после полоскания полости ротоглотки кипяченой водой комнатной температуры. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. В течение шести часов перед процедурой нельзя использовать медикаменты, орошающие носоглотку или ротоглотку и препараты для рассасывания во рту. Мазки со слизистой носоглотки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых). После забора материала конец зонда с тампоном опускают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков до места слома, при этом гибкая часть зонда сворачивается спиралью, далее, прикрывая сверху пробирку крышкой, рукоятку зонда опускают вниз, добиваясь полного отламывания верхней части зонда. Пробирку герметично закрывают. Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами из полистирола с вискозными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды и зондом с мазком из носоглотки. Конец зонда с тампоном отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку.

Смыв из ротоглотки для диагностики эпидемического паротита (выделение РНК). Перед взятием смывов из ротоглотки проводят предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 с) 25-40 мл изотонического раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через стерильную воронку в стерильный флакон на 50 мл.

Хранение образцов

  • при комнатной температуре – в течение 6 ч.
  • при температуре от 2°С до 8°С – в течение 3 суток
  • при температуре минус 20°С – в течение 1 недели
  • при температуре минус 70°С – длительно

Мазки из ротоглотки и носа для диагностики дифтерии, пневмококковой, стафилококковой, стрептококковой инфекции (культуральные исследования) – для взятия материала используется сухой стерильный ватный тампон, вмонтированный в пробку пробирки или готовые транспортные среды, отдельным тампоном из ротоглотки и из носа. Взятие мазков осуществляют натощак или не ранее двух часов после еды, не касаясь тампоном языка, внутренних поверхностей щек и зубов.

Мазки из ротоглотки и носа для диагностики менингококковой инфекции (культуральные исследования) – тампон вводят через ротовую полость ватным концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2–3 раза по задней стенке. При извлечении из ротоглотки тампон не должен касаться окружающих тканей (зубы, слизистая щек, язык, небный язычок). После извлечения тампона содержащуюся на нем слизь засевают на чашки (сывороточный агар и сывороточный агар с линкомицином) или помещают в транспортную среду для немедленной доставки в лабораторию. Допускается применение коммерческих питательных транспортных сред разрешенных к применению в Российской Федерации в установленном порядке.

Мазки из носоглотки для диагностики гриппа (культуральные исследования) собирают стерильными зондами с вискозными тампонами из нижнего носового хода. Зонд с тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход глубоко, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых). После взятия материала тампон, не нарушая стерильности, помещают в пробирку с 2,0–5,0 мл вирусологической транспортной среды. Материал хранят в течение 24 ч при температуре 2–8°С, более длительно – при температуре не выше минус 16°С.

Мазки из носоглотки для диагностики коклюша (культуральные исследования) собирают стерильными зонд-тампонами с вискозным наконечником на алюминиевой основе, вмонтированный в пробку и пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем. Зонд извлекают из упаковки, вводят через носовые ходы и удерживают в носоглотке в течение 10 сек, чтобы он пропитался отделяемым слизистой носоглотки. После этого тампон извлекают, делая упор на боковую стенку носа, и немедленно помещают в пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем. Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить в холодильнике при температуре 2–8°С не более 12 ч).

Заднеглоточные мазки для диагностики коклюша (культуральные исследования) собирают стерильным зонд-тампоном с вискозным наконечником на алюминиевой основе, вмонтированным в пробку, вносят в пробирку с транспортной средой AMIES с активированным углем. Целесообразно использовать готовые комплекты. Зонд извлекают из упаковки, пробирку со средой вскрывают, конец зонда (на расстоянии 2 см от конца с тампоном) помещают в пробирку и изгибают под углом 135°, делая упор на внутренний край пробирки, и извлекают из пробирки. Аккуратно прижимая язык пациента шпателем, вводят изогнутый тампон в ротовую полость ниже язычка и собирают материал с задней стенки глотки, не задевая язык, слизистую оболочку щек и миндалины. Зонд с биоматериалом помещают в пробирку со средой AMIES, следя за тем, чтобы пробка, в которую вмонтирован тампон, плотно закрывала пробирку. Пробирки с транспортной средой AMIES до использования хранят при комнатной температуре. После взятия материала тампон, не нарушая стерильности, помещают в пробирку с 2,0–5,0 мл вирусологической транспортной среды. Собранный материал необходимо исследовать в день получения (в исключительных случаях – хранить в холодильнике при температуре 2–8°С не более 12 ч).

Мазки со слизистой носоглотки для диагностики кори (культуральные и исследования, выделение РНК) – для взятия материала используют стерильный ватный тампон, которым протирают слизистую оболочку носоглотки с достаточным усилием, чтобы снять часть эпителиальных клеток. Тампоны помещают в маркированные стерильные пробирки с завинчивающимися крышками, в которых содержится 2–3 мл транспортной среды для вирусов. Если образец не может быть доставлен в вирусологическую лабораторию в течение 48 часов при температуре 4–8°С, пробирку с тампоном следует энергично встряхнуть так, чтобы смыть клетки, а затем извлечь тампон. Смывы центрифугируют при температуре 4°С при 500g (1500 об./мин) в течение 5 минут, затем осадок ресуспендируют в 2 мл питательной среды для клеточных культур.

Ресуспендированный осадок и надосадочную жидкость хранят раздельно при температуре –70°С и транспортируют в лабораторию на сухом льду в герметично закрытых флаконах, чтобы избежать попадания в них углекислоты.

Мазки из носоглотки для обнаружения антигенов внутриклеточных патогенов собирают стерильными зондами с вискозными тампонами из нижнего носового хода. Зонд с тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину глубоко (вплоть до слез у пациента), делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После взятия материала тампон помещают в пробирку с 3 мл 0,1 моль/л фосфатно-солевого буферного раствора. Для получения суспензии клеток тампон в пробирке тщательно отжимают о стенки пробирки, тампон удаляют, пробирку закрывают. Проводят центрифугирование в течение 5 мин при 3000 об/мин для осаждения клеток. Надосадочную жидкость осторожно удаляют, а осадок клеток ресуспендируют в нескольких каплях фосфатно-солевого буферного раствора и наносят на предметные стекла (не менее 3 шт.) раздельными каплями. Препарат высушивают и фиксируют 10 мин в охлажденном до 2–8°С химически чистом ацетоне. Фиксированные предметные стекла хранят при температуре 2–8°С не более 6–7 дней.

Исследование проводят методом посева на плотные питательные среды с использованием прибора WASP, Copan, Италия. Идентификацию микроорганизмов проводят методом масс-спектрометрии с помощью прибора Microflex Brucker Daltonik MALDI Biotyper, BRUKER, Германия. Определение чувствительности к антимикробным препаратам проводят диско-диффузионным методом с использованием анализатора ADAGIO, BIO-RAD, Франция; определение чувствительности к бактериофагам – путем посева бактериальной культуры на плотную питательную среду с последующим нанесением бактериофага.

Синонимы: Upper Respiratory Culture,Routine. Bacteria Identification. Antibiotic Susceptibility and Bacteriophage Efficiency testing.

Поражение носа (ринит, синусит), слизистой оболочки глотки (фарингит) нередко обусловлены бактериальной инфекцией, в основном пневмококком, стафилококом (ринит), гемолитическим стрептококком (фарингит).

Данный метод включает в себя качественное и полуколичественное бактериологическое исследование биоматериала с целью выделения и идентификации этиологически значимых микроорганизмов − возбудителей заболеваний верхних дыхательных путей − с определением чувствительности выделенных патогенов к антимикробным препаратам (антибиотикам) и бактериофагам.

Антибиотики относятся к лекарственным препаратам, эффективность которых является наиболее очевидной для лечения бактериальной инфекции. Основным ограничением эффективности антимикробных препаратов является способность микроорганизмов формировать устойчивость (резистентность) к их действию. Этот естественный процесс многократно ускоряется при необоснованном и избыточном применении антимикробных препаратов в качестве средств профилактики в медицине, средств самолечения широкими кругами населения.

Учитывая наличие указанных проблем, антимикробный препарат следует назначать только при наличии обоснованных показаний (документированная или предполагаемая бактериальная инфекция) и с учетом результатов определения чувствительности к нему выделенного возбудителя.

В ряде случаев, в условиях растущей антибиотикорезистентности, а также для пациентов, имеющих противопоказания к приему антибиотиков, актуальной альтернативой антибактериальным препаратам служат бактериофаги. В медицине используют их способность разрушать клетки болезнетворных микроорганизмов. Литическое действие бактериофагов строго специфично. В производстве фаговых препаратов учитывают специфичность бактериофагов и готовят поливалентные фаговые препараты – смеси бактериофагов, активных в отношении различных типов возбудителей. При применении бактериофаги не нарушают нормального биоценоза человека, могут применяться в комплексной терапии с другими лекарственными средствами. Бактериофаги не вызывают дисбиоз, аллергию, не подавляют иммунную систему; разрешены к применению у детей с 0 месяцев, у беременных и в период лактации. При необходимости использования бактериофагов в лечебных и/или профилактических целях необходимо проводить оценку чувствительности к ним возбудителя.

  • условно-патогенные микроорганизмы: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Branchamella catarrhalis, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus; грамотрицательные бактерии семейства энтеробактерий;
  • грибы рода кандида (Candida albicans и др.);
  • представители нормальной флоры: зеленящие стрептококки (Streptococcus viridans group), коагулазонегативные стафилококки (Staphylococcus еpidermidis), непатогенные нейссерии (Neisseria spр.), непатогенные дифтероиды (Corynebacterium spр.), и некоторые другие.

С какой целью проводят посев отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору, определение чувствительности к антимикробным препаратам и бактериофагам

Посев биоматериала проводят с целью выделения и идентификации этиологически значимых микроорганизмов − возбудителей заболеваний верхних дыхательных путей, а также для определения чувствительности выделенных патогенов к антибиотикам и бактериофагам.

Микробиологическое исследование, направленное на выделение возбудителя и - при его выявлении - на определение его чувствительности к антибиотикам для подбора оптимальной терапии пародонтита. При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам). При обнаружении микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору, чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.

Синонимы русские

Посев на факультативно-анаэробную бактериальную флору; микрофлора при заболеваниях тканей пародонта; посев на анаэробы; посев на анаэробные бактерии; анаэробные бактерии, посев, отделяемое десневого кармана.

Метод исследования

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из десневого кармана.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не проводить туалет полости рта в день взятия биоматериала на исследование.

Общая информация об исследовании

Десневым, или зубодесневым, карманом является углубление между десной и зубом. Если данное углубление патологически увеличивается, то речь идет о возникновении пародонтального кармана. В процессе развития пародонтита происходит воспаление десны вследствие воздействия бактериальных агентов. Изменения, связанные с возникновением патологического зубодесневого кармана, связаны с изменением микробного состава зубного налета. В норме в тканях десны содержится незначительное количество бактерий: палочки и кокки. При воспалении увеличивается количество подвижных палочек и спирохет. Наличие пародонтального кармана можно заподозрить при жалобах на локализованные боли, при утолщении десны, десневых кровотечениях и нагноениях, при подвижности зубов, сине-багровом цвете десневого края. Основным диагностическим методом является зондирование десневого края вдоль каждой поверхности зуба. Содержимое десневого кармана состоит в основном из смеси микроорганизмов, лейкоцитов и продуктов их жизнедеятельности, остатков пищи, остатков эпителиальных клеток. Изменение зубодесневого прикрепления вследствие пародонтита может иметь постоянный прогрессирующий характер, при котором выделяют периоды ремиссии и обострения. Если во время ремиссии воспалительная реакция снижена или вообще отсутствует, то во время обострения наблюдается увеличение клинических проявлений с наличием десневого экссудата, в котором можно определить большое количество подвижных бактерий и спирохет. В лечении используются различные методы: антибактериальная терапия, кюретаж, хирургическое лечение и др., в том числе комбинации различных методов.

Анаэробная микрофлора – это микроорганизмы, для жизнедеятельности и размножения которых не требуется кислород, для многих из них он, наоборот, является губительным. Анаэробы населяют организм человека в норме (в пищеварительном тракте, органах дыхания, мочеполовой системе). При снижении иммунитета или травмах, повреждениях возможна активация инфекции с развитием воспалительного процесса. Организм человека тогда может становиться по сути источником заражения сам для себя (эндогенное инфицирование). Реже анаэробы попадают в организм снаружи (глубокая колотая рана, инфицированный аборт, ранения брюшной и грудной полости, введение спиц и протезов). Развиваясь в толще кожи, мягких тканей и мышц, анаэробные организмы способны вызывать целлюлиты, абсцессы, миозиты. Симптомы, позволяющие заподозрить анаэробную инфекцию мягких тканей: плотный отёк, газообразование (ощущение, что лопаются пузырьки воздуха под кожей при надавливании), гнилостное воспаление, зловонный запах.

Основное лечение анаэробного воспаления – хирургическое. При этом необходимо устранить источник воспаления либо раскрыть рану, обеспечив доступ кислорода, губительного для анаэробов.

Для дифференциальной диагностики анаэробной и аэробной инфекции проводят посев биоматериала на флору, так как принципы лечения в том или ином случае будут разные. Анаэробные микроорганизмы обладают чувствительностью к довольно узкому спектру антибактериальных препаратов, поэтому целесообразно проводить лекарственную терапию после определения чувствительности к антибиотикам. По выросшей культуре определяется вид микроорганизмов, которые участвуют в формировании воспалительной реакции. Зная вид возбудителя, можно подобрать антибактериальный препарат, который способен успешно влиять на данные микроорганизмы и способствовать более эффективной санации пародонтальных карманов.

После выявления культуры бактерий целесообразно провести определение их чувствительности к разным антибиотикам. В связи с тем что все чаще наблюдается развитие антибиотикорезистентности микроорганизмов, подбор антибиотиков по их спектру действия на бактерии может привести к малоэффективному или вообще безрезультатному лечению. Преимуществом метода определения чувствительности к антибиотикам является точное определение антибактериального препарата, имеющего наивысшую эффективность в конкретном случае.

Микробиологическое исследование биоматериала из зева для диагностики инфекционных заболеваний верхних дыхательных путей. Используется для определения вида возбудителя и исследования чувствительности выделенных микроорганизмов к антибактериальным лекарственным препаратам и бактериофагам.

Что входит в комплекс

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Посев из зева на микрофлору с определением чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам и бактериофагам?

  1. Выявление возбудителя инфекционного заболевания;
  2. Мониторинг эффективности проводимой терапии.

Подробное описание исследования

Микрофлора тела человека играет важную роль в поддержании здоровья. На протяжении всей жизни на ее состав влияет ряд физиологических и социальных факторов.

Первые микроорганизмы начинают заселять тело новорожденного еще при прохождении родовых путей матери во время родов. В последующем микробное сообщество сохраняется в организме, увеличивая биологическое разнообразие и изменяя видовой и количественный состав микробной флоры. Совместная жизнь человеческого организма с бактериями оказывает колоссальное влияние на состояние здоровья.

В норме микрофолора ротоглотки играет защитную роль и является так называемым фильтром, который противодействует заселению организма болезнетворными бактериями.

Микрофлора зева — главным образом бактерии, вирусы и грибы — включает в себя нормальную резидентную флору, которая присутствует в течение всей жизни и быстро восстанавливается в случае нарушения, и транзиторную флору, которая может колонизировать слизистую оболочку ротоглотки в течение нескольких часов или недель, но не сохраняется на более длительный период.

Количественный и качественный состав нормальной микрофлоры зева достаточно стабилен и включает: стрептококки, сапрофитные нейсерии, лактобактерии, стафилококки, дифтероиды, пептострептококки, бактероиды, коринебактерии, фузобактерии, актиномицеты.

Под воздействием внешних факторов (переохлаждение, травмы) или если иммунитет человека ослаблен по другой причине, представители условно-патогенной микрофлоры ротоглотки могут проявить свои патогенные свойства и стать причиной развития инфекционных заболеваний верхних дыхательных путей.

Инфекции верхних дыхательных путей распространены среди людей всех возрастов. Заражение ими возможно в любое время, но пик заболеваемости обычно приходится на осенне-зимний период. В данную группу входят следующие заболевания:

  1. Ринит — воспаление слизистой оболочки носа;
  2. Фарингит — воспаление глотки;
  3. Тонзиллит — воспаление глоточных и небных миндалин;
  4. Ларингит — воспаление гортани.

Инфекции верхних дыхательных путей, как правило, проявляются следующими типичными клиническими симптомами:

  1. Насморк, заложенность носа;
  2. Боли в горле;
  3. Чихание;
  4. Кашель;
  5. Головная боль;
  6. Повышение температуры тела;
  7. Общее недомогание;
  8. Боли в мышцах.

У пациентов с острым воспалением ротоглотки важными задачами являются установление точного диагноза и назначение адекватной терапии. Вероятность ошибки при дифференциальной диагностике данных заболеваний высока именно из-за сходства клинических проявлений при вирусном и бактериальном генезе заболевания.

Посев отделяемого из зева является стандартом диагностики инфекций верхних дыхательных путей, подтверждающим или опровергающим роль бактерий в развитии данных заболеваний.

После выявления возбудителя инфекции проводят исследование его чувствительности к антибактериальным препаратам (антибиотикам) и бактериофагам — лекарственным препаратам, которые представляют собой вирусы, избирательно поражающие бактерий и тем самым ограничивающие рост и размножение последних.

Этот этап особенно важен при выборе лекарственного препарата для терапии инфекционного заболевания, потому как позволяет избежать распространения инфекции и ее осложнений у конкретного пациента.

Читайте также: