Сколько по времени инкубируют посевы нитрифицирующих бактерий при 28 c

Обновлено: 06.07.2024

8.1. Техника посева и выделения чистых культур микроорганизмов

Доставляемый в лабораторию материал подвергают бактериологическому исследованию в тот же день. Техника посева зависит от характера засеваемого материала, консистенции питательной среды и цели исследования.

Для проведения посевов необходимы: подлежащий исследованию материал, питательные среды, бактериологическая петля, шпатели (стеклянные, металлические), пастеровские и градуированные пипетки, металлические кюветы или поднос для переноса засеянных чашек и металлические коробки для переноса пробирок, ведро или бачок с крышками для сброса отработанного инфицированного материала, спиртовая или газовая горелка.

Жидкий материал для посева берут петлей или пипеткой. При взятии петлей жидкость должна образовать в кольце петли тонкую прозрачную пленку – "зеркало". Пипетками пользуются в том случае, когда материал засевают в большом или точно отмеряемом объеме.

Способ взятия плотного материала определяется его консистенцией. При посевах чаще всего пользуются бактериологической петлей.

Все манипуляции, связанные с посевом и выделением микробных культур, производят над пламенем горелки. Бактериальную петлю перед взятием материала прокаливают в пламени горелки, затем ее остужают так, чтобы при соприкосновении с жидкой средой она не вызывала кипения жидкости, а прикосновение к агару не сопровождалось его плавлением. Для остуживания петли лучше всего погружать ее в конденсационную жидкость пробирки со стерильной питательной средой или прикасаться к крышке чашки Петри со стерильной средой. Нельзя остужать петлю прикосновением к поверхности питательной среды, даже свободной от микробного роста, так как на ней могут находиться колонии, не видимые простым глазом.

После окончания посева петлю прожигают повторно для уничтожения находящейся в ней микробной культуры или инфицированного микроорганизмами материала.

Пипетки и шпатели, использованные для посевов, опускают в дезинфицирующий раствор.

После посева на чашках Петри со стороны дна, на пробирках – в верхней трети надписывают название засеянного материала или ставят номер анализа и дату посевов.

8.1.1. Техника посевов на плотные и жидкие питательные среды

При посеве в жидкую питательную среду петлю с находящимся на ней материалом погружают в среду. Если материал вязкий и с петли не снимается, его растирают на стенке сосуда, а затем смывают жидкой средой. Жидкий материал, набираемый в пастеровскую или градуированную пипетку, вливают в питательную среду.
При посеве на скошенный мясопептонный агар пробирку берут в левую руку между I и II пальцами, чтобы основание пробирки находилось на поверхности кисти руки и посев осуществлялся под контролем глаза. Пробку из пробирки вынимают правой рукой IV и V пальцами, не прикасаясь к той ее части, которая входит внутрь пробирки. Остальные три пальца правой руки остаются свободными для взятия бактериологической петли, посредством которой производится посев. Петлю держат, как писчее перо. После вынимания пробки пробирку с питательной средой держат в наклонном положении во избежание попадания в нее посторонних микроорганизмов из воздуха.

При посеве на скошенный агар петлю с находящимся на ней пересеваемым материалом вводят в пробирку до дна, опускают плашмя на поверхность питательной среды и скользящими движениями наносят штрихи снизу вверх от одной стенки пробирки к другой (рис. 8.1).

• При посеве на поверхность плотной питательной среды из пробирки в чашки Петри пробирку фиксируют II, III и V пальцами левой руки, а крышку чашки Петри приоткрывают I и IV пальцами левой руки настолько, чтобы в образовавшуюся щель свободно проходили петля или шпатель (рис. 8.2). Небольшое количество исследуемого материала, взятого из пробирки бактериологической петлей, втирают в поверхность питательной среды у края чашки. Затем петлю прожигают, чтобы уничтожить избыток находящегося на ней материала. Линию посева начинают с того места, в котором находится материал. Бактериологическую петлю кладут плашмя на питательную среду, чтобы не поцарапать ее поверхность, и проводят штрихи по всей среде или по секторам, разграфив предварительно дно чашки (при условии, что среда прозрачна) на 4, 8 или 16 равных частей. Нужно стараться, чтобы штрихи, наносимые петлей, располагались как можно ближе друг к другу, так как это удлиняет общую линию посева и дает возможность получить изолированные колонии микробов в концевой ее части.
• Для равномерного распределения засеваемого материала по поверхности плотной питательной среды можно пользоваться вместо петли тампоном или шпателем.

При обилии в засеваемом материале микробов они растут в виде пленки, покрывающей всю поверхность питательной среды. Такой характер микробного роста получил название сплошного или газонного. Посев газоном производят, когда нужно получить большие количества микробной культуры одного вида.

Для посева материала в толщу плотной питательной среды готовят взвесь в стерильной водопроводной воде или в изотоническом растворе. Набирают 0,1–1 мл взвеси в пипетку (в зависимости от степени предполагаемого микробного загрязнения) и выливают в пустую стерильную чашку Петри. Вслед за этим чашку заливают 15–20 мл мясопептонного агара, расплавленного и остуженного до температуры 40– 45 "С (при такой температуре пробирка со средой, приложенная к щеке, не должна вызывать ощущения ожога). Для равномерного распределения исследуемого материала в питательной среде закрытую чашку с содержимым слегка вращают по поверхности стола.
Посев уколом в столбик питательной среды производят в пробирку со средой, застывшей в виде столбика. Пробирку берут в левую руку как обычно, и в центре столбика до дна пробирки вкалывают петлю с находящимся на ней материалом.
Калиброванной бактериологической петлей (диаметр 2 мм, емкость 0,005 мл) производят посев мочи на сектор А чашки Петри с простым агаром, сделав около 40 штрихов. Затем петлю прожигают и производят 4 штриховых посева из сектора А в сектор I, из сектора I в сектор II и из сектора II в сектор III, каждый раз после прожигания петли (рис. 8.3).

Чашки инкубируют при температуре 37 °С в течение 18– 24 ч, после чего подсчитывают количество колоний, выросших в разных секторах, и определяют количество бактерий в 1,0 мл по приведенной табл. 8.1 (этот метод принят для определения степени бактериурии).

Таблица 8.1. Определение количества бактерий в 1 мл методом секторных посевов*

Количество колоний в секторах

Количество бактерий в 1 мл

*Приказ № 535 от 22 апреля 1985 г. "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений" (Москва, 1985).

8.1.2. Методы выделения чистых культур

Чистой культурой принято называть совокупность однородных микроорганизмов, относящихся к одному виду, полученных из массы одной колонии, клетки которой идентичны по морфологическим, тинкториальным, культуральным, метаболическим и генетическим признакам, так как по существующим представлениям микробная колония является популяцией бактериальных клеток, возникшей в результате размножения единственной материнской клетки. Микробная колония являются аналогом клона.

Чистые культуры микроорганизмов одного вида, выделенные из различных источников, могут отличаться друг от друга незначительным отклонением морфологических, культуральных или биохимических признаков, не выходя за пределы своего вида или подвида. Такие культуры называют штаммами. Вместо ранее именованных типов в зависимости от характера изменившегося признака их обозначают морфоварами (отличные по морфологическим признакам), сероварами (имеющие антигенные отличия), биоварами (отличающиеся биологическими свойствами).

Чистая культура необходима для изучения морфологических, культуральных, биохимических и антигенных свойств, по совокупности которых определяется видовая принадлежность исследуемого микроорганизма.

Для выделения чистых культур микробов из материалов, содержащих обильную смешанную микрофлору, предложено много различных методов. Наибольшее распространение получил метод механического разъединения микроорганизмов, находящихся в исследуемом материале, с целью получения изолированных колоний на поверхности или в глубине питательной среды. Очень широко применяются селективные питательные среды, стимулирующие развитие тех микроорганизмов, чистую культуру которых предполагается выделить. Некоторые виды микробов обладают высокой чувствительностью к воздействию определенных факторов внешней среды. Индивидуальная устойчивость микробов к тому или иному фактору была использована для разработки методов выделения чистых культур путем умерщвления сопутствующей микрофлоры. Этим способом производится выделение споровых форм микробов, устойчивых к действию высокой температуры, микобактерий туберкулеза, безразличных к действию концентрированных растворов минеральных кислот, в отличие от остальных микробов, содержащихся в мокроте.

При выделении чистой культуры патогенных микробов из патологического материала, загрязненного посторонней микрофлорой, прибегают иногда к заражению лабораторных животных, восприимчивых к тому виду микроба, который предполагается выделить из исследуемого материала. Биологический метод выделения чистой культуры применяется при исследовании мокроты на содержание в ней пневмококков, микобактерий туберкулеза.

Получение чистой культуры методом рассева в глубине среды (по Коху). Три пробирки, содержащие по 15 мл мясопептонного агара, ставят в водяную баню для расплавления агара. Расплавленную среду остужают до температуры 43–45 °С. В пробирку вносят одну бактериологическую петлю исследуемого материала. Для лучшего перемешивания материала со средой засеянную пробирку вращают несколько раз, зажав между ладонями. После этого одну петлю (прокаленную и остуженную) содержимого 1-й пробирки переносят во 2-ю и таким же образом из 2-й в 3-ю. Приготовленные разведения микробов выливают из пробирок в стерильные чашки Петри, обозначенные номерами, соответствующими номерам пробирок.

После застудневания среды с исследуемым материалом чашки помещают в термостат. Количество колоний в чашках с питательной средой уменьшается по мере разведения материала.

Выделение чистой культуры по способу Дригальского. Расплавленную питательную среду разливают в три чашки Петри. Застывшую среду обязательно подсушивают, так как влажная поверхность ее способствует образованию сливного роста. В первую чашку вносят одну каплю исследуемого материала и стерильным шпателем втирают его в поверхность питательной среды. Далее, не прожигая шпателя и не набирая нового материала, шпатель переносят во 2-ю, а затем и 3-ю чашки, втирая в поверхность питательных сред оставшийся на нем материал.

Метод рассева по поверхности, предложенный Дригальским, является наиболее употребительным для получения чистой культуры микробов. Вместо шпателя можно пользоваться петлей. Материал на питательной среде распределяют параллельными штрихами по всей чашке в одном направлении. Затем, повернув чашку на 90°, проводят штрихи в направлении, перпендикулярном первым штрихам. При таком способе посева материал, находящийся в петле, расходуется постепенно, и по линиям штрихов, нанесенных в конце посева, вырастают изолированные колонии микробов.

Выращивание и выделение чистых культур анаэробов. Для выращивания анаэробов необходимо создать определенные условия, сущность которых заключается в удалении молекулярного кислорода из питательной среды и пространства, окружающего эти культуры. Другим обязательным условием, обеспечивающим выделение анаэробов из исследуемого материала, является внесение большого количества посевного материала в питательную среду.

Единственным отличием питательных сред, применяемых для выращивания анаэробов, служит пониженное содержание в них свободного кислорода. Самым простым способом удаления растворенного кислорода является кипячение. Непосредственно перед посевом материала пробирки с питательными Средами кипятят на водяной бане в течение 10–20 мин. При кипячении из среды вытесняется воздух и, следовательно, удаляется кислород. Свежепрокипяченную питательную среду быстро охлаждают, погружая в лед или подставляя под струю холодной воды, чтобы не дать ей насытиться кислородом воздуха, и используют для посева. Для уменьшения диффузии кислорода из воздуха питательные среды заливают сверху стерильным вазелиновым или парафиновым маслом (толщина слоя 1–1,5 см). Засев среды производят пипеткой сквозь масло в наклонном положении пробирки.

В качестве редуцирующих веществ используют глюкозу, аскорбиновую кислоту, цистеин, гликокол, глутатион. Активно связываются с кислородом животные ткани паренхиматозных органов. На этом свойстве животных клеток основано приготовление питательной среды Китта – Тароцци (рецепт 161), широко применяемой для выращивания анаэробов. В жидкие питательные среды помещают иногда пористые вещества: вату, пемзу, которые адсорбируют на своей поверхности пузырьки воздуха.

Для создания бескислородных условий используют физические, химические и биологические факторы.

Физические способы культивирования анаэробов:

• способ Виньяля – Вейона. Берут 4–5 пробирок с 0,5 % расплавленным и охлажденным до температуры 40–45 °С сахарным агаром. В содержимое одной из них вносят пипеткой небольшое количество исследуемого материала и тщательно размешивают. Для уменьшения концентрации материала с целью получения изолированных колоний засеянную среду в количестве, соответствующем объему внесенного материала, переносят из 1-й пробирки во 2-ю, из 2-й в 3-ю. Затем содержимым каждой пробирки заполняют капилляры трех пастеровских пипеток.

Чтобы предупредить застывание питательной среды в момент насасывания ее в пипетки, пока их кончик не обломлен, пипетки погружают на 3–5 мин в стерильную воду с температурой 45–50 °С. После заполнения вытянутый конец трубки запаивают и помещают в стеклянный цилиндр с ватой на дне. Через 2–3 сут в столбике агара вырастают ясно видимые колонии микробов-анаэробов. Выросшие колонии легко изолировать. Для этого капилляр надрезают напильником выше уровня намеченной колонии, надламывают, а колонию микроба, находящуюся в агаре, извлекают петлей и пересевают в свежую питательную среду;

• выращивание анаэробов в условиях вакуума. Вакуумные условия для выращивания анаэробов создают в анаэростате или эксикаторе. Исследуемый материал или культуру микробов засевают в пробирки с жидкой средой или в чашки Петри с плотной питательной средой. Посевы помещают в анаэростат, затем присоединяют его к насосу и выкачивают воздух. Степень разреженности воздуха определяют по показаниям вакуумметра. Колонии анаэробов в вакуумных условиях растут на поверхности плотной питательной среды.

Химические методы выращивания анаэробов (метод Аристовского). Материал, исследуемый на наличие анаэробов, засевают на среду в чашки Петри и помещают их в эксикатор, на дно которого кладут химический поглотитель кислорода: гидросульфит натрия или пирогаллол. В расширенную часть сосуда устанавливают на подставке чашки с посевами. Прибор закрывают крышкой и помещают в термостат при температуре 37 *С на 24–48 ч.

Биологический метод выращивания анаэробов (по Фортнеру). В чашку Петри наливают толстым слоем 5 % кровяной агар с 1–2 % глюкозы. Посередине чашки в питательной среде вырезают стерильным скальпелем канавку шириной 1–1,5 см, которая делит питательную среду на две половины. Одну из них засевают культурой анаэробов или исследуемым на их наличие материалом, другую половину – культурой аэробов: чудесной палочкой (Serratia marcescens) или кишечной палочкой (Escherichia coli). Перед посевом чашки подсушивают в термостате, чтобы аэробы вместе с капельками влаги не могли попасть на другую сторону чашки. Засеянные чашки закрывают, а свободное пространство между дном и крышкой заклеивают лейкопластырем, чтобы предупредить поступление в чашку кислорода извне. В термостате чашки устанавливают вверх дном. Быстро растущие аэробы, поглощая находящийся в чашке кислород, создают тем самым благоприятные условия для роста анаэробов.

Анаэростат для культивирования анаэробов. Анаэростат – прибор для выращивания микробов в анаэробных условиях – представляет собой толстостенную металлическую или пластиковую камеру с герметически привинчивающейся крышкой, на которой имеются вакуумметр и два крана для присоединения к вакуум-насосу. Вместо кислорода в нем используются газовые смеси.

На сервисе СпросиВрача доступна консультация гинеколога онлайн по любой волнующей Вас проблеме. Врачи-эксперты оказывают консультации круглосуточно и бесплатно. Задайте свой вопрос и получите ответ сразу же!

Здравствуйте, Анастасия. А дважды перед лечением что Вас беспокоило?
Вы сдавали Фемофлор или только бак посев?

Фемофлор показывает соотношение хорошей микрофлоры влагалища (лактобактерий) и условно-патогенной (которая всегда есть во влагалище и выполняет свою функцию, но в определенных обстоятельствах - снижение иммунитета, переохлаждение, перенесенное заболевание, прием антибиотиков, сильный стресс - условно-патогенной флоры становится больше, появляются симптомы - выделения, зуд, жжение, неприятный запах. Это не инфекции, передающиеся половым путем, это нарушение баланса микрофлоры влагалища.
ПЦР на что Вы сдавали, можете добавить к анализу?
Чем лечились в первый и второй раз?

По последнему бакпосеву от 18.04 - высеяна условно патогенная флора в больших титрах - да она может быть причиной жжения.
В прошлом бакпосеве - кишечная палочка и кандида, кандиды стало меньше, кишечная палочка осталась
По цитологии есть лейкоциты - косвенный признак воспаления.
Самое главное нет атипичных, злокачественных клеток, шейка в отношении онкологии здорова. В 2021 году цитология хорошая. По ней эктопия железистого эпителия, когда железистый эпителий который должен быть внутри шейки матки, в цервикальном канале - немного выходит на ее поверхность. Это абсолютная норма, которая не подлежит лечению. Поэтому даже не переживайте.
ВПЧ нет, бактериального вагиноза нет.
Лечение было мощным, и в первый и второй раз - веротяно не может восстановиться нормальная флора - лактобактерии и из за этого постоянные рецидивы.
Скажите, пожалуйста, что Вас беспокоило до первого лечения, после первого до начала второго лечения? Были жалобы, или Вы сдавали анализы профилактически?

Адэль, после 2 лечения сначала было всё хорошо, но потом снова появились те же признаки. У моего молодого человека в посеве так же обнаружили кишечную палочку. Она может постоянно передаваться от меня к нему и наоборот?

Имеет смысл лечить Ваши жалобы, а не кишечную палочку, энтерококки, лейкоциты и так далее. Кишечная палочка половым путем не передается. Кишечная палочка есть у всех - просто у кого то в меньшем, у кого то в большем количестве.
Хорошо бы сдать Фемофлор 16, чтобы понимать, в какую сторону нарушение условно-патогенной флоры. ПЦР на инфекции тоже не увидела - на хламидии, трихомонады, гонококки и микоплазму гениталиум - потому что часто нарушение флоры бывает на фоне инфекций. Возможно антибиотиками была снижена лактофлора, и теперь нечему сопротовиляться, вот и условно-патогенная флора начала расти. Поэтому цель, сначала подавить условно-патогенную флору, потом длительно восстанавливать свою.
Сейчас Вам необходимо соблюдать режим:
1. Не носить синтетическое белье - только хлопковое и свободное.
2. Не носить ежедневные прокладки - они создают "парниковый эффект", и в результате начинает расти анаэробная флора, которой не нужен кислород, кандида и другие микроорганизмы.
3. Ограничить сладкое – это питательный субстрат для условно-патогенной флоры, и добавить в рацион больше кисломолочной продукции. Например, стакан кефира каждый вечер.
4. Питьевой режим - не менее 30 мл чистой воды на килограмм веса.
5. Подмываться средствами гигиены без всяких добавок и отдушек - чем проще, тем лучше. Не спринцеваться
Соблюдайте здоровый образ жизни - больше прогулок на свежем воздухе, сбалансированное питание, полноценный сон и отдых, умеренная физическая активность, и самое главное: избегать стрессов
Из лечения бактериального вагиноза:
1. Можно использовать интравагинально гель Клиндамицин Б пролонг 1 аппликатор на ночь 3 дня.
2. затем Лактагель по 1 тюбику на ночь во влагалище 7 дней, затем по 1 тюбику 1 раз в 3 суток в течение 3 месяцев
Если нет возможности - можно Ацилакт по 1 свече на ночь 10 дней , затем по 1 свече раз в 3 суток в течение 3 месяцев.
Снизится титр условно-патогенной флоры - поднимутся лактобактерии - дальше все восстановится самостоятельно.
При нарушении флоры - самое главное - не залечивать и не перелечивать, потому что очень хрупкий баланс микрофлоры - избыточное количество препаратов будет просто убивать хорошие лактобактерии - поэтому и рекомендуется длительная терапия лактобактериями - потому что пока лактофлора не наладится - будут рецидивы - так что важно эту флору восстановить режимом и препаратами с лактобактерями.
Обязательна консультация гастроэнтеролога и обследование желудочно-кишечного тракта, так как рецидивирующие нарушение флоры влагалища в большинстве случаев возникает именно из-за проблем с кишечником.
Если жалоб не будет - контрольные анализы сдавать не нужно - чтобы не лечить без повода.
Итого - Фемофлор 16+ПЦР на хламидии, гонококки, трихомонады - если не сдавали, консультация гастроэнтеролога, режим.

В этой статье мы коснемся вопросов бакпосева: где сдать, сколько делается по времени, расшифровка бак посева, важность бак посева при беременности.

При бактериологических посевах высеваются микроорганизмы из любого биологического материала. Исследовать можно спинномозговую жидкость, желчь, отделяемое глаз, половых органов и ран. Можно сделать бак посев крови, бак посев кала, бак посев мочи и бак посев мокроты, а также бак посев спермы (эякулята).

В норме кровь человека не содержит возбудителей. Подтвердить или исключить наличие бактерий в крови просмотром ее под микроскопом невозможно. Бак посев крови дает возможность размножить бактерии (при их наличии) сначала в жидкой питательной среде. Культуральная среда с образцом крови содержится при температуре +37° С до видимого роста бактерий.

Обычно этот процесс занимает 6-18 часов, а в случае видов, которые растут медленно, может длиться несколько дней. Затем культура исследуется под микроскопом - это первый шаг в идентификации вида микроорганизмов, которые могут присутствовать в крови (кокки, палочки и другие). При последующем посеве жидкой культуры на плотную среду производится более точная идентификация колоний - проводятся химические тесты и окончательно определяется вид микроорганизма. Бак посев крови нужно делать до начала лечения антибиотиками, поскольку они могут отсрочить или подавить рост бактерий, и это даст ложноотрицательный результат. Забор крови проводят на пике температуры – в это время количество бактерий в крови максимально. Лаборатории рекомендуют делать забор второго образца крови через 1 час после первого - этим повышаются шансы обнаружения бактерий.

Бак посев кала на тифопаратифозную группу назначают для выявления различных кишечных инфекций для идентификации возбудителя. В кишечнике в норме имеются условно-патогенные микроорганизмы - клебсиелы, энтеробактеры, грибы Candida, протей, стафилококки, клостридии, псевдомонады. Изменения нормальной микрофлоры кишечника (ее количественных или качественных характеристик) создают условия для развития условно патогенных бактерий, что сопровождается жалобами на боли в животе, метеоризмом, урчанием, неустойчивым стулом.

Бак посев кала на дисбактериоз проводят в случае заболеваний ЖКТ, которые сопровождаются рвотой и расстройством стула.

Нормальный состав кишечной флоры

Расшифровка бак посева кала:

I степень – отмечаются невыраженные изменения в аэробной части микробиоценоза, при этом посторонняя микрофлора отсутствует;

II степень - характерно изменения количества лакто - и бифидофлоры, параллельно проявляется количественные изменения эшерихий;

III степень характеризуется резким снижением и даже отсутствием бифидофлоры, лактофлоры и преобладают гемолитические стафилококки и дрожжеподобные грибы;

IV степень – характерны глубокие изменения микробиоценоза: увеличение условно-патогенных микроорганизмов, появление протея.

При сдаче кала на данный анализ необходимо помнить, что прием антимикробных препаратов и пробиотиков в значительной степени оказывает влияние на достоверность результата. Поэтому обследование рекомендуется производить через 3 недели после отмены препаратов.

Биоматериал для исследования берется до начала антибактериальной терапии, если же это контрольный анализ после лечения, то сдать его нужно не ранее двух недель после окончания курса антибиотиков. На анализ собирается средняя порция утренней мочи в стерильный одноразовый контейнер. Для обследования достаточно 3-5 мл мочи. Сбор мочи осуществляется после туалета наружных половых органов. Мочу необходимо доставить на исследование в течение 1-2 часов, если температура +18+20°С, в холодильной камере возможно хранение до 5-6 часов.

Расшифровка бак посева мочи:

Диагностическое значение имеет концентрация микроорганизмов в моче 104 - 105 КОЕ/мл. Однако бывают случаи, когда общий анализ мочи нормальный, жалоб обследуемый не предъявляет, а в моче выявлены патогенные микроорганизмы, например, кишечная палочка, которая могла появиться из-за нестерильных условий проведения исследования и нарушений при доставке. В таком случае бак посев мочи следует повторить.

При наличии хронического бронхита или часто повторяющихся острых затяжных бронхитах целесообразно сделать бак посев мокроты. Бак посев мокроты, как и любого другого отделяемого, сдается в стерильную посуду и доставляется в лабораторию, где проводится бак посев. Бак посев мокроты и одновременное определение чувствительности к антибиотикам позволит рационально назначить лечение, сократить его сроки при максимальной эффективности.

В каких случаях назначается бак посев спермы?

Мужчинам при воспалительных заболеваниях урогенитальной области, при бесплодии обязательно назначается спермограмма и бак посев спермы (эякулята). Бак посев эякулята (спермы) позволяет выявить наличие патогенного агента и вовремя начать лечение.

Существуют правила сдачи бак посева спермы:

в течение 3-7 дней исключить половые связи;
запрещен прием алкоголя в течение 3-4 дней;
бак посев спермы (эякулята) назначается через 2 недели после приема антибиотиков;
эякулят для бак посева собирают в стерильный контейнер с питательной средой, который нужно получить в лаборатории;
утром необходимо помочиться, тщательно вымыть руки с мылом, произвести туалет наружного отверстия мочеиспускательного канала тоже с мылом. После этого головку полового члена и крайнюю плоть высушить стерильной салфеткой. Сбор спермы для бакпосева производится путем мастурбации, касаться стенок контейнера нельзя;
сперму нужно доставить в лабораторию в течение 3 часов после сбора. Если сперма для бак посева не может быть доставлена за это время, то до момента доставки она должна храниться в холодильнике, но не более 24 часов;
если проводится бак посев эякулята с целью исследования на уреа- и микоплазмы, материал помещается во флакончик со специальной транспортной средой для микоплазм. Также имеется среда для культивирования трихомонад. Об этом нужно знать и предупредить в лаборатории, когда берете стерильный контейнер для бак посева спермы.

Обычно через 7 дней бак посев эякулята будет готов.

Бак посев при беременности

В любой отрасли медицины – пульмонология, дерматология, урология, андрология, венерология, гинекология используется бак посев при обследовании.

Наиболее часто этот метод обследования использует гинекология. Бакпосев назначается беременным женщинам в обязательном порядке, если они при планировании беременности не делали этот анализ. С наступлением беременности в связи с тем, что организм женщины становится уязвимым, появляется необходимость регулярно наблюдаться у врача. За время беременности женщина должна несколько раз сдать анализы, что является необходимым для выявления различных заболеваний, которые негативно могут повлиять на течение беременности и сказаться на здоровье малыша. В списке обязательных анализов числится и бакпосев при беременности – в этот период исследуется материал из влагалища, носа, зева и моча.

Бак посев из влагалища при беременности является необходимым и важным обследованием. Забор материала на бакпосев при беременности проводится очень аккуратно, этой процедуры не стоит бояться. Патогенная флора влагалища (стафилококк, хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, трихомонады) может вызвать нарушения в формировании и развитии плода и быть причиной заболеваний, опасных для его жизни. Бак посев при беременности позволяет выявить во влагалище грибок рода Кандида, который поддерживает хроническое воспаление тканей, которые в родах будут наиболее подвержены разрывам. Таким образом, бак посев при беременности позволяет выявить латентно протекающие заболевания, потенциально опасные как для матери, так и для ребенка. При необходимости проводится лечение, а контрольный бак посев мазка после лечения назначается не ранее, чем через 2 недели после окончания приема антибактериальных препаратов.

Обязательным обследованием является бакпосев из зева и носа при беременности. Делается этот анализ сразу при взятии на учет в женской консультации. Забор материала проводится медперсоналом в поликлинике или непосредственно в лаборатории. Бак посев из зева и выявление носительства золотистого стафилококка помогает вовремя принять меры: просанировать беременную женщину и предупредить заражение ребенка. Есть еще причина, по которой важно и нужно сделать бак посев при беременности на золотистый стафилококк – он является основной причиной гнойного мастита и послеродового сепсиса, поэтому носительство его требует лечения перед родами.

Особое значение уделяется бак посеву мочи при беременности. Известно, что при беременности нарушается пассаж мочи по мочевыводящим путям и создаются условия для размножения патогенной флоры, а бак посев мочи при беременности и расшифровка бак посева позволяет врачу вовремя обнаружить патологию, принять необходимые меры и не пропустить развитие пиелонефрита, который часто встречается у беременных. Бакпосев мочи при беременности сдается два раза: во время постановки на учет и в сроке 36 недель беременности. В некоторых случаях приходится сдавать больше, если к этому есть показания: заболевания почек, появление белка и лейкоцитов в клиническом анализе мочи. Чтобы анализ был достоверным, нужно соблюдать процедуру сбора мочи. Необходимо тщательно подмыться, для исключения попадания выделений из влагалища ввести в него кусочек ваты, первую порцию утренней мочи выпустить в унитаз и собрать среднюю порцию мочи в стерильную баночку и доставить в лабораторию. При любом бак посеве обследование проводится до приема антибиотиков или по окончании их приема через 3 недели. Часто возникающий вопрос – бак посев, сколько раз делается? После лечения проводится однократный контрольный анализ с интервалом в 2-3 недели.

Бакпосев. Где сдать?

У многих возникнет этот вопрос. Обычно все необходимые обследования назначает врач. В таком случае правильно и грамотно будут назначены все обследования и вас проинформируют, в какой лаборатории это можно сделать. Но можно самостоятельно обратиться в лабораторию и сдать бакпосев. Лаборатория, которая занимается бакпосевами, имеет стерильную медицинскую посуду для забора материала, обученный медицинский персонал, который может взять мазки у женщин и мужчин и расскажет, как правильно подготовиться к исследованию и сдать материал для исследования.

Как вариант, можно предложить сдать бак посев в ИНВИТРО - независимой лаборатории. Это сеть четырех высокотехнологичных лабораторий в городах: Москве, Санкт-Петербурге, Челябинске и Новосибирске. Независимая лаборатория ИНВИТРО применяет современное новейшее оборудование и использует тест-системы ведущих мировых производителей. Она предлагает большой спектр исследований: анализы крови и мочи (клинические и биохимические), цитологические исследования, определение аллергенов и онкомаркеров, ПЦР, бак посев. ИНВИТРО – проводит широкий спектр лабораторных исследований.

Всех интересует вопрос на тему бак посев, сколько делается по времени? Через 5-8 дней (в зависимости от исследуемого материала) вы получите результаты бак посева. За это время идентифицируются микроорганизмы и проводится антибиотикограмма. Обычно результаты бак посева выдаются на руки и в бланке обозначены результаты бакпосева и норма его. Результат исследования также можно получить по электронной почте, факсу, телефону.

Расшифровка бакпосева проводится микробиологом в лаборатории, и врачу выдается заключение; в случае, если плохой бак посев - назначается лечение.

Что значит плохой бак посев? Имеются определенные допустимые нормы присутствия тех или иных микроорганизмов, которые не вызывают субъективных ощущений и заболеваний. Так, например, уреаплазмы и микоплазмы могут входить в состав нормальной микрофлоры человека, и лечение требуется лишь тогда, когда имеются большая концентрация микробов и признаки воспаления.

Существует понятие колониеобразующие единицы (КОЕ) – это одна микробная клетка, из которой в последствие вырастает колония. В этой единице и указываются результаты бак посева. Для каждого метода посева существуют стандарты, указывающие клинически значимые концентрации микроорганизмов, которые могут вызвать заболевание. При превышении колониеобразующих единиц лаборатория сразу выполняет бакпосев и чувствительность к антибиотикам. Такой бакпосев с определением чувствительности к антибиотикам необходим для рационального проведения антибиотикотерапии.

Разработчик сайтов, журналист, редактор, дизайнер, программист, копирайтер. Стаж работы — 25 лет. Область интересов: новейшие технологии в медицине, медицинский web-контент, профессиональное фото, видео, web-дизайн. Цели: максимально амбициозные.

Запись опубликована: 17.04.2019
Время чтения: 1 mins read

Как проводится выявление микроорганизмов методом посева и для чего нужен этот анализ

При инфекционном поражении следует узнать, какой микроб вызвал болезнь и с помощью какого антибиотика от него лучше избавиться. Поэтому нужно, чтобы возбудитель проявил себя, показав слабые стороны.

Для этого берутся образцы крови, мочи, слюны, секрета простаты, семенной жидкости, слизи из уретры и цервикального канала, носоглотки, мокроты, грудного молока, содержимого ран и язв. Материал переносится на питательные среды – специальные смеси, на которых микробы лучше всего растут. Для посева используются плоские чашечки Петри или пробирки.

Затем образец помещают в температурные условия, наиболее благоприятные для микробного роста, и оставляют на определенное время. Через некоторое время на питательных средах начинают появляться микробные колонии – скопления возбудителя, расположенные внутри среды или вовне.

Снаружи разрастаются анаэробные микробы, которым для жизни требуется воздух. Внутри питательной среды развиваются анаэробы – микробы, не любящие воздух и развивающиеся без него.

Из полученных колоний делают мазки, которые рассматривают под микроскопом, чтобы выяснить, какая именно микробная культура высеялась. Делается также вывод об их количестве (обсемененности). Этот показатель важен для дозировки применяемых препаратов. Чем больше обнаружено возбудителей, тем выше будет доза антибактериального средства, назначенного врачом.

Количественный анализ учитывается при выявлении условно-патогенной микрофлоры. Эти микробы и грибки не доставляют проблем, если находятся в организме в ограниченном количестве. Однако превышение норм приводит к болезням, поэтому требует назначения лекарств. Один из самых известных условно-патогенных микроорганизмов – грибок кандида, вызывающий при разрастании его колоний кандидоз (молочницу).

При проведении анализа определяется чувствительность микрофлоры к антибиотикам. Для этого проводится специальный тест, называемый антибиотикограммой.

Патогенные бактерии пересаживают в благоприятную среду и подвергают воздействию различных антибактериальных средств. Для этого в чашку Петри, где находятся колонии микробов, помещают бумажные полоски, смоченные в антибиотике. Через 3-5 дней оценивают результат:

Микробная гибель на расстоянии 2,5 см от полоски говорит о высокой чувствительности микробов к данному антибактериальному препарату.
Если все возбудители умерли в радиусе 1,5-2,5 см, чувствительность к антибиотику средняя.
Если микробы погибли на расстоянии менее 1,5 см от полоски, чувствительность будет слабой. Такой препарат применять нежелательно.
При отсутствии гибели колоний считается, что данный антибиотик на эту микрофлору не действует.

Степень чувствительности указывается в результатах анализов, чтобы врач потом мог назначить наиболее эффективные препараты.

Анализ желательно проводить всем больным перед началом антибиотикотерапии. Чувствительность к антибактериальным препаратам – индивидуальная характеристика, которая может отличаться у разных больных, даже страдающих одним и тем же заболеванием.

Таким же образом проводится анализ на чувствительность к бактериофагам – специальным вирусам, убивающим определенные виды бактерий.

Микробиологическая диагностика позволяет выбрать из огромного количества выпускаемых препаратов наиболее подходящий и эффективный.

Антибиотикотерапия без проведения анализов может быть абсолютно бесполезной, а иногда и вредной. Микробы, как и любые другие существа, конкурируют друг с другом, поэтому уничтожение одних бактерий всегда вызывает рост других. Если же применять антибиотики без проведения посева, можно убить абсолютно не ту флору, позволив возбудителям инфекции бесконтрольно размножаться.

Для определения каких микроорганизмов чаще всего проводятся бактериальные посевы

Разнообразной кокковой флоры, вызывающей гнойное поражение половых путей, органов дыхания, ЛОР-органов, нагноения ран и язв.
Дифтерийной палочки – возбудителя опасной болезни – дифтерии, поражающей дыхательные пути, глаза, нос.
Возбудителей кишечных инфекций – кишечную палочку, дизентерийную группу, брюшнотифозные бактерии, возбудителей паратифа, сальмонеллу, иерсинию.
Разнообразных микробов, вызывающих урогенитальные патологии и половые инфекции – гонококк, микоплазму, уреаплазму, трихомонаду, грибок молочницы.
Кроме того, высевают возбудителей, которые могут вызывать различные заболевания – энтеробактерии, гемофильные микроорганизмы, клебсиеллы.

Показания к проведению посевов на флору и чувствительность к антибиотикам

Любые урогенитальные патологии, в том числе ЗППП. Этот метод диагностики особенно рекомендуется при инфекциях, трудно поддающихся лечению.
Проблемы с кишечником. Анализ высевает все основные кишечные группы и позволяет подобрать не только антибиотики, но и пробиотики.
Любые гнойные поражения – язвы, раны, лактационный мастит. С помощью посева можно понять, какие микробы вызывали нагноение, и подобрать антибиотик.
Беременность – в этот период делаются посевы из носоглотки, чтобы выявить микрофлору, опасную для будущего малыша.
ЛОР-инфекции и поражение дыхательных путей. Проведение бакпосева рекомендуется при затяжных ринитах, фарингитах, частых ангинах. Это позволит выявить микроорганизмы, вызывающие указанные заболевания.
Анальный зуд – в этом случае нужно сдать посев на грибок молочницы, который часто вызывает такой симптом.
Обследование детей перед поступлением в дошкольное учреждение и школу, поездкой в детский лагерь или санаторий.
Профосмотр работников, занятых в пищевой промышленности или работающих с продуктами питания.

Недостатки исследований на бактериальный посев

Длительное время проведения анализа. Нужно не только выявить возбудителя, но и определить его чувствительность, что занимает много времени. К сожалению, ускорить этот процесс нельзя. Бактерии вырастают в термостате – приборе, поддерживающем нужную температуру, за определённое время. Ускорение приведет к искажению результатов.
Не все представители микрофлоры высеваются в питательную среду – существуют виды, которые невозможно вырастить в лабораторных условиях.
Возможность ложноотрицательного результата, который возникает, если пациент перед сдачей материала принимал антибиотики или использовал местные антибактериальные препараты.

Поэтому при сдаче анализов на посев нужно очень аккуратно и точно соблюдать все предписания врача.

Как происходит взятие материала

Анализ сдается как минимум через 10 суток после окончания антибиотикотерапии. Перед забором материала нельзя мыть место его взятия гелем или мылом с антибактериальными компонентами.

Процедура зависит от материала, который берется на диагностику:

Моча собирается утром после подмывания половых органов без использования антибактериального мыла. Образец собирается в чистую емкость в объеме примерно 10-15 мл и сразу доставляется в лабораторию. Образцы, взятые с клеенок и суден, не подходят из-за бактериальной загрязненности.
Перед взятием мазков из половых путей нельзя спринцеваться, вводить свечи и гели. Материал не собирается во время критических дней.
Образец на анализ кала берется утром специальной лопаткой в чистую посуду в объеме примерно 30 мг. Нельзя использовать кал, взятый у детей из подгузников, полученный с помощью клизм и слабительных средств.
Мокроту собирают в специальную чашечку после чистки зубов и полоскания полости рта. Анализ из носоглотки и горла берется медперсоналом клиники.
Грудное молоко собирают после мытья груди и обработки околососковой зоны спиртом. Первые капли сцеживаются, чтобы промыть молочные протоки, а затем собирается 15 мл в пробирку.
Мазок из уретры у мужчин берется врачом-урологом. Перед этим в течение 5-6 часов желательно воздержаться от мочеиспускания, иначе урина смоет микробов, и результат будет неточным.

Сколько времени делается анализ, расшифровка

Тем, кто решился на такое обследование, нужно помнить, что быстро такая диагностика не проводится. Минимальный срок, как правило, составляет 3-4 дня, а максимальный – до 10 сут. За это время нужно вырастить возбудителя и определить его чувствительность к антибиотикам.

Количество выявленных микроорганизмов оценивается в КОЕ/мл, где это КОЕ – колониеобразующие единицы. Чем выше этот показатель, тем больше микробов обнаружено. В бланке анализов обязательно указывается чувствительность к наиболее распространенным антибиотикам (высокая, средняя, низкая).

Самостоятельно больному определить, какая именно флора была высеяна, очень сложно. Поэтому с полученным анализом нужно обратиться к урологу, гинекологу, маммологу, который проведет расшифровку результатов.

Это несложное исследование позволит выявить и вылечить самые различные инфекции – от простых до достаточно сложных. Антибиотики и другие антибактериальные препараты, назначенные по результатам анализов, действительно пойдут на пользу.

Читайте также: