Транспортная среда для посева

Обновлено: 17.09.2024

Среда для переноса вирусов (VTM) — это питательное вещество, используемое для переноса и поддержания жизнеспособности образцов (вирусов) в лабораторию для идентификации и дальнейшей обработки образца.

  • Транспортные среды для вирусов особенно важны, поскольку они более лабильны, чем другие инфекционные агенты.
  • Вероятность успешного выделения увеличивается, когда временной интервал между сбором и инокуляцией культуры меньше и когда образец содержит как можно больше вирусных частиц.
  • Чтобы максимально увеличить количество вируса в образце, забор образцов следует проводить на ранней стадии болезни пациента.
  • Успешная и надежная изоляция вирусов может быть достигнута при использовании подходящей транспортной среды.
  • Количество выделений также увеличивается, когда образцы вирусов отправляются либо в местную лабораторию, либо в референс-лабораторию.

Принцип вирусной транспортной среды (VTM)

  • Вирусные агенты широко различаются по составу, стабильности, структуре, морфологии и размеру. Вирусы с неплотной оболочкой, полученные из образцов человека, обычно более лабильны, чем вирусы с плотной оболочкой без оболочки.
  • Поскольку они неустойчивы к условиям окружающей среды, жизнеспособность этих вирусов должна быть защищена с помощью различных решений.
  • Некоторые вирусы в оболочке, такие как вирусы простого герпеса (HSV), удивительно стабильны в незамороженном состоянии при помещении в подходящую среду хранения. Однако большинству вирусов требуется более низкая температура.
  • Инфекционность вирусов со временем снижается, и, как правило, скорость распада зависит от температуры, поэтому стабильность повышается за счет охлаждения.
  • Таким образом, вирусные транспортные среды готовятся с целью обеспечения соответствующих условий температуры, pH и питательных веществ.
  • Компоненты подходящей вирусной транспортной среды выбираются для создания изотонического раствора, содержащего белки для защиты вирусной структуры, антибиотики для контроля микробного загрязнения и один или несколько буферов для контроля pH.
  • Среды для переноса вирусов готовятся с целью поддержания жизнеспособности вирусной культуры или образцов для таких тестов, как тест амплификации нуклеиновых кислот (NAAT), при одновременном предотвращении высыхания образца.

Состав вирусной транспортной среды (VTM)

Идеальная среда для переноса вирусов должна обладать многими из следующих характеристик;

  1. Это сохранит активность вируса даже при комнатной температуре.
  2. Он будет нетоксичным для клеточных культур и не заслонит проявление вирусных цитопатических эффектов.
  3. Он будет иметь длительный срок хранения (в замороженном или незамороженном состоянии).
  4. Он может применяться как для выделения культур, так и для прямых тестов, таких как иммуноферментный анализ или иммунофлуоресценция .

Для достижения всех вышеупомянутых характеристик вирусные транспортные среды обычно содержат защитный белковый компонент, антимикробные агенты для предотвращения вероятности заражения и буферы для поддержания pH раствора.

Некоторые VTM также содержат дополнительные ионы и минералы, которые помогают поддерживать жизнеспособность таких образцов.

Использование вирусной транспортной среды (VTM)

  • Среды для переноса вирусов используются для сбора и транспортировки образцов, содержащих вирусы.
  • Они также используются для поддержания жизнеспособности других организмов, таких как микоплазма, хламидии и уреаплазма.
  • VTM также помогают максимизировать количество вирусных частиц в образце.
  • Жидкие транспортные среды используются в основном для транспортировки тампонов или материалов, попавших в среду из тампона для сбора.
  • Это облегчает сбор и транспортировку образцов в местах, где нет холодильного оборудования.

Ограничения вирусной транспортной среды (VTM)

  • Некоторый рост загрязняющих веществ может наблюдаться в течение длительного периода транспортировки.
  • После транспортировки образец следует как можно скорее засеять соответствующей средой. Для получения оптимальных результатов промежуток времени между сбором образца и посевом на культуральную среду должен быть сокращен до минимума.
  • Некоторые вирусы могут быть более лабильными, чем другие, и VTM могут быть столь же эффективными.
  • Некоторые антибиотики и химические вещества, используемые в VTM, могут изменять pH раствора, что влияет на жизнеспособность организма.

Оформите заявку на сайте, мы свяжемся с вами в ближайшее время и ответим на все интересующие вопросы.

Любое лабораторное исследование состоит из нескольких этапов: преаналитического, аналитического, постаналитического. Если аналитический этап полностью проходит в лаборатории, то два других этапа имеют довольно основательную внелабораторную составляющую. Эта их особенность значительно затрудняет проведение согласованных, последовательных мероприятий по обеспечению качества.
Одну из самых рутинных процедур в диагнозе бактериальных инфекций составляет процесс сбора и безопасной для сохранности транспортировки клинических проб от пациента в лабораторию. Эта операция может быть выполнена при помощи транспортных пробирок.


Пробирки с транспортной средой до использования хранятся при комнатной температуре. Так как транспортная среда представляет собой гелеобразное вещество – пробирку с биоматериалом можно транспортировать как в вертикальном, так и в горизонтальном положении. Бактериальные культуры гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при t0 15-220С.

В лаборатории используют различные виды транспортных сред, как с углем, так и без угля. Уголь обладает свойством поглощать субстанции, которые известны как токсичные для бактерий, поэтому транспортные системы, содержащие уголь используют в том случае, когда биоматериал в микробиологическую лабораторию доставляется не в первые сутки. В повседневной же работе чаще используют системы, не содержащие угля. В зависимости от вида биоматериала и требовательности микроорганизма в лаборатории используют различные системы - транспортная система со средой Амиеса с активированным углем для выделения аэробных и анаэробных, а также прихотливых микроорганизмов из горла, влагалища и раневого отделяемого (рисунок 2); транспортная система со средой Амиеса без активированного угля для выделения аэробных и анаэробных, а также прихотливых микроорганизмов из горла, влагалища и раневого отделяемого; транспортная система со средой Кари-Блэйра для выделения аэробных и анаэробных, а также прихотливых микроорганизмов из фекалий; транспортная система со средой Стюарта для хранения и транспортировки в клиническую лабораторию нейссерий и других прихотливых микроорганизмов; транспортная система со средой для грибов рода Candida для хранения и транспортировки в клиническую лабораторию грибов рода Candida; транспортная система с тиогликолевой средой для хранения и транспортировки в клиническую лабораторию кампилобактерий и других микроорганизмов.


Микроорганизмы в материале пробы защищены от высыхания влагой, содержащейся в транспортировочной среде. Эта среда предназначена для сохранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов во время транспортировки в лабораторию.
После отбора проб тампон помещается в пробирку с транспортировочной средой и доставляется в лабораторию, где проводится культивация микроорганизмов на соответствующих питательных средах.
Транспортная системы предназначены для сбора и транспортировки только бактериологических проб. Для анаэробных обследований предпочтительнее использовать являются следующие: пробы тканей, полученные во время хирургических процедур, биопсия тканей или кости, жидкость, гной или отсосанные газы, собранные с использованием шприца. Для проб, содержащих вирусы или хламидии, не могут быть использованы данные транспортные системы.

Каждая пробирка снабжена этикеткой, на которой предусмотрено место для внесения сведений о фамилии пациента, дате и времени отбора пробы, номере истории болезни, подписи врача, отобравшего материал, наименовании образца и названии медучреждения.
Применение этих изделий, как стандартных закрытых систем, не требует использования дополнительных нестандартных, смонтированных вручную средств предохранения взятого материала от посторонней контаминации, высыхания и т. д. Главным образом, они используются для взятия, сохранения и транспортировки материала в ограниченные сроки (до 5 часов) на небольшие расстояния. Например, транспортировка проб внутри медучреждения, при отборе и транспортировке проб, взятых на вызове у больного, или при экстренной доставке проб из медучреждения в ближайшую контрольную лабораторию.
Таким образом, опыт работы с такими транспортными средами свидетельствуют о возможности использования их в клинической микробиологии.


Литература:
1. Донецкая Э.Г. Клиническая микробиология: Руководство для специалистов клинической лабораторной диагностики. – М.:ГЭОТАР-Медиа, 2011 – 480с.
2. Баймуратова М.А., Алдашев А.А., Оспанов К.С. и др. Совершенствование работы микробиологической лаборатории. Методические рекомендации. Алматы, 2009.- 74с.
3. Медицинская микробиология под ред. Покровского В.И. //М. ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 2001. - 1184 с.
4. Митрохин С.Д. Микробиологическая диагностика урогенитальных инфекций// Инфекции и антимикробная терапия. - 2005. - № 3, т. 11.

Использование для транспортировки многих образцов биоматериала (гной, кишечное содержимое и т.п.) обычных питательных сред является, зачастую, серьезной ошибкой, поскольку в них идет быстрое размножение менее требовательных сапрофитных микроорганизмов. Физиологический раствор, который часто применяют для этой цели, не обеспечивает поддержания стабильных уровней редокс–потенциала и рН, а это, в свою очередь, существенно ограничивает жизнеспособность многих патогенных бактерий.

В настоящее время в клинике в качестве транспортных сред (консервантов) используются различные по составу композиции с разной степенью питательной ценности. Использование той или иной их них определяется соответствующими инструкциями, методическими рекомендациями и указаниями, в том числе утвержденными Минздравом РФ.

Это могут быть буферные растворы, содержащие только минеральные соли –– изотонический раствор хлорида натрия или фосфатно-буферный раствор, а также консерванты, содержащие органические вещества –– буферно-глицериновый солевой раствор, глицериновый консервант, 0,15%-ная пептонная вода, буферно-казеиново-дрожжевая среда.

Состав этих композиций следующий:

Калия дигидрофосфат 0,45 г

Динатрия гидрофосфат 5.34 г

Вода дистиллированная 1000 мл

Буферный глицерино-солевой раствор

Натрия хлорид 4,2 г

Дикалия гидрофосфат 3,1 г

Калия дигидрофосфат 1,0 г

Глицерин нейтральный 300 мл

Вода дистиллированная 700 мл

Натрия хлорид 0,85% раствор 1000 мл

Глицерин нейтральный 500 мл

Динатрия гидрофосфат 20% раствор 150 мл

0,1% пептонная вода

Вода дистиллированная 100 мл

Пептон бактериологический 0,1 г

Натрия хлорид 0,5 г

Калия нитрат 0,1 г

Натрия бикарбонат 0,2 г

Гидролизат казеина 2,0 г

Экстракт пекарских дрожжей 5,0 мл

Фосфатно-буферный раствор до 1000 мл

Так для транспортировки энтеробактерий в качестве консервантов рекомендуется использовать физиологический раствор, глицериновый и фосфатно-буферный растворы. Инструкция по лабораторной диагностике кампилобактериоза предусматривает использование для этих целей, кроме физиологического раствора, 0,1%-ную пептонную воду (от 3 до 48 ч.) или тиогликолевую среду для контроля стерильности (до 3 суток).

Следует отметить, что охлаждение до 4 о С позволяет значительно удлинить сроки транспортировки образцов на этих средах: в физиологическом растворе –– до 24 часов, в 0,1% пептонной воде –– до 72 часов и на тиогликолевой среде для контроля стерильности –– до 5 – 7 суток. При исследовании материала на наличие иерсиний глицериновые консерванты не пригодны. В этом случае исследуемый материал хранят при 4 – 8 о С 7 – 15 дней в фосфатно-буферном растворе или буферно-казеиново-дрожжевой среде.

Известно несколько десятков сред, которые потенциально могут быть использованы как транспортные. Однако большинство из них не отвечают одному из двух обязательных требований, которые и определяют пригодность среды именно как транспортной . Транспортная среда, с одной стороны, должна обеспечивать сохранение жизнеспособности микроорганизма, причем не менее 8 – 12 часов при комнатной температуре, и, в то же время, обязана предупредить или в значительной степени лимитировать размножение микроорганизмов.

Последнее особенно важно. Необходимо сохранить жизнеспособность той части патогенной микрофлоры, которая вне хозяина быстро гибнет, особенно при условии конкурентного роста менее требовательных микроорганизмов. Как уже отмечено, эта ситуация встречается очень часто, если исследуется раневое отделяемое, кишечное содержимое, мокрота, мазки из зева и некоторые другие биосубстраты. Облигатно анаэробные бактерии, пневмококки, гемофильные бактерии, нейссерии и многие другие микроорганизмы трудно выделить из биоматериала, если параллельно идет процесс интенсивного размножения сапрофитных бактерий или более жизнестойких болезнетворных микроорганизмов. Кроме того, гибель требовательных бактерий определяется созданием неблагоприятных для них условий, таких как неблагоприятные рН, окислительно-восстановительный потенциал, наличие или отсутствие свободного кислорода, а также действие антимикробных метаболитов, которые при определенных условиях могут образовывать актиномецеты, псевдомонады, эшерихии и другие содержащиеся в образце микроорганизмы.

Опыт создания и использования транспортных питательных сред велик и формально велика их номенклатура. Однако фактически в мировой практике стабильно используют только две транспортные среды, которые именуют по фамилиям их создателей: среда Эймса и среда Кери-Блейра, и которые являются наиболее универсальными транспортными средами для сохранения подавляющего большинства видов бактерий. Среда Эймса предназначена для широкого круга бактерий, среда Кери-Блейра для кишечных микроорганизмов.

Среда Кери-Блейра была предложена разработчикам в 1954 году. За прошедший длительный период ее рецептура фактически не менялась. Не вызывало разночтений и назначение среды –– изначально оно трактовалось как сохранение микроорганизмов при транспортировании с акцентом на микроорганизмы кишечника.

Натрия хлорид 5,0 г

Динатрия гидрофосфат 1,1 г

Кальция хлорид 0,1 г

Натрия тиогликолят 1,5 г

Вода дистиллированная до 1000 мл

Микроорганизмы кишечника многообразны, они включают представителей резидентной и транзиторной микрофлоры. Последняя в свою очередь может включать самые разнообразные бактерии и грибы, в т.ч. сапрофитные. В то же время, практика микробиологических служб клинических учреждений нацелена на выделение определенного круга микроорганизмов кишчника, прежде всего представителей семейства энтеробактерий (шигеллы, сальмонеллы), реже т.н. неферментирующих грамотрицательных бактерий, кишечных кокков и дрожжеподобных грибов.

Транспортная среда Кери-Блейра предупреждает гибель микробных клеток, сохраняет их жизнеспособность, но при этом препятствует размножению. Эти свойства среды обеспечиваются ее компонентным составом. Низкая питательная ценность и, прежде всего, отсутствие источников азота и углерода, как ключевых элементов развития популяции, ограничивает процессы роста и размножения микроорганизмов.

Процедура использования этой среды заключается в следующем: расплавленную среду Кери-Блейра разливают в стерильные пробирки по 6 – 9 мл. Объем среды в пробирках определяется техникой посева. При посеве мазка, взятого тампоном на тампонодержателе, достаточен небольшой столбик среды –– 6 мл. При прямом посеве биоматериала (без тампона) объем среды в пробирке увеличивают. В таком виде среду можно длительно хранить при температуре 2 – 8 о С.

Биологический материал погружают в столбик среды таким образом, чтобы он не оставался на ее поверхности. После этого пробирку с засеянной средой помещают в контейнер и направляют в лабораторию.

Среда Кери-Блейра сохраняет жизнеспособность требовательных бактерий около суток, после чего отмечают постепенную гибель клеток. Поэтому пересев с транспортной среды на обогащенные, дифференциально-диагностические или иные питательные среды необходимо проводить в максимально доступные сроки. Вместе с тем, есть данные о том, что сальмонеллы в этой среде сохраняют жизнеспособность несколько месяцев.

Среда Эймса используется как транспортная для широкого круга микроорганизмов самых разнообразных биологических субстратов (гной, раневое отделяемое, мокрота, СМЖ и др.), кроме кала. Среда Эймса может быть с углем и без него:

Натрия хлорид 3,0 г

Динатрия гидрофосфат 1,05 г

Калия дигидрофосфат 0,2 г

Калия хлорид 0,2 г

Кальция хлорид 0,1 г

Магния хлорид 0,1 г

Натрия тиогликолят 1,0 г

(как необязательный компонент) 10,0 г

Вода дистиллированная до 1000 мл

Уголь добавляют в среду Эймса для сорбции микробных метаболитов, негативно влияющих на высокочувствительные патогенные микроорганизмы. В частности, это условие особенно важно для сохранения жизнеспособности гонококков.

Техника посева на среду Эймса такая же, как и на среду Кери-Блейра.

Противоречиво мнение о пригодности среды Эймса для транспортировки биосубстратов с облигатно-анаэробными бактериями. Безусловно, наличие низкого редокс-потенциала, который обеспечивается тиогликолятом натрия, а также столбик полужидкого агара, в который погружается биоматериал, ограничивают контакт микроорганизмов с атмосферным кислородом и поступление его в среду в растворенном виде, что может способствовать сохранению жизнеспособности ряда видов облигатно-анаэробных бактерий (наиболее демонстративны в этом отношении клостридии). Однако среда не обеспечит длительного сохранения тех облигатных анаэробов, которые высоко чувствительны к кислороду (например, некоторых видов бактероидов).

Кроме отмеченных выше, имеется широкий перечень транспортных сред, применяемых для транспортирования определенных видов микроорганизмов. Наиболее строгие требования предъявляются к транспортированию материала, подлежащего бактериологическому исследованию на наличие неспорообразующих анаэробных микроорганизмов. Эти бактерии быстро погибают при контакте с кислородом воздуха, что заставляет использовать для транспортирования материала сосуды, заполненные инертным газом. Так, например, хорошо известна жидкая обогащенная среда под инертным газом с гемином и витамином К для прямого посева крови и жидких биосубстратов. Она служит одновременно транспортной средой и средой для культивирования анаэробных бактерий, включая строгих анаэробов

Натрия глицерофосфат 10,0 г

Натрия тиогликолят 1,0 г

Кальция хлорид 0,1 г

Налидиксовая кислота 0,04 г

Панкреатический перевар казеина 20,0 г

Натрия хлорид 2,5 г

Дикалия гидрофосфат 1,5 г

Натрия тиогликолят 0,5 г

Натрий сернистокислый 0,2 г

Цефалотин 0,02 г

Ванкомицин 0,02 г

Амфотерицин В 0,002 г

Триметоприм 0,002 г

Полимиксин В 3000 ЕД

Приведенная пропись мало чем отличается от состава других питательных сред для кампилобактерий (см.заключительную главу). Очевидно, что разработчики среды сделали акцент, в первую очередь, на селекционирующем действии антибиотиков, сохранив, в целом, состав среды, достаточный для поддержания жизнеспособности многих микроорганизмов.

Такой же принцип использован в транспортной среде для хламидий. Кроме того, в ней учтена возможность применения для селекции осмотического фактора (дано на литр).

Дикалия гидрофосфат 2,1 г

Калия дигидрофосфат 1,1 г

Сыворотка крови крупного

рогатого скота 50,0 мл

Ванкомицин 0,1 г

Стрептомицин 0,05 г

Нистатин 25000 ЕД

Антибиотики и сыворотку асептично вводят в стерильную питательную среду перед ее разлитием во флаконы и пробирки.

Существует ряд достаточно сложных по составу транспортных питательных сред для нейссерий, микоплазм и их сочетаний преимущественно в биосубстратах, полученных из мочеполового тракта. Некоторые варианты рассматриваются как транспортные среды для требовательных бактерий в целом, но особенно для нейссерий. Пропись одной из них, принадлежащей к большой группе т.н. Transgrow Medium, приведена далее (дано на литр).

Гемоглобин 10,0 г

Панкреатический перевар казеина 7,5 г

Натрия хлорид 5,0 г

Кукурузный крахмал 1,5 г

Дикалия гидрофосфат 4,0 г

Калия дигидрофосфат 1,0 г

Витамин В 12 0,001 г

Тиамин пирофосфат 0,001 г

П-Аминобензойная кислота 0,0002 г

Антибиотическая добавка 10,0 мл

Антибиотическая добавка включает ряд антибиотиков, призванных придать среде селективные свойства. Имеется ряд предложений, ни одно из которых в полной мере, естественно, не может обеспечить гарантированное подавление роста сопутствующих микроорганизмов. В разных источниках наиболее часто упоминают следующий состав (на литр среды добавляют 10 мл раствора антибиотиков).

Полимиксин В 0,0075 г

Ванкомицин 0,0035 г

Триметоприм 0,0035 г

Нистатин 12500 ЕД

В заключение следует еще раз подчеркнуть, что несмотря на большое число предложенных прописей транспортных сред, в микробиологической (медицинской) литературе наиболее часто упоминают среды Эймса и Кери-Блейра. Ряд авторов считает приемлемой среду Стюарта, которая, фактически, является предшественницей двух других. Среда Эймса большинству авторов представляется предпочтительней, чем среда Стюарта.

ГЛАВА 8. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ

Среди возбудителей заболеваний человека энтеробактерии относятся к числу относительно нетребовательных микроорганизмов. Они способны давать рост на различных базовых питательных средах, используемых в микробиологических исследованиях. Однако семейство Enterobacteriaceae достаточно обширно; оно объединяет разные по своим свойствам бактерии. Кроме того, те области человеческого тела, где многие представители семейства являются объектом естественного обитания или паразитирования, обильно населены резидентной микрофлорой. Вот почему питательные среды, используемые при работе с энтеробактериями, в первую очередь решают задачу их селективного выделения и бактериологической диагностики. Это характерно как для отечественной, так и зарубежной практики.

Согласно многим отечественным методическим рекомендациям и указаниям, в том числе одобренных Минздравом, как обязательные при бакдиагностике энтеробактерий предложено использовать среды обогащения, среды для селективного выделения и дифференциации. Их перечень приведен в таблице. Названы те среды, которые освоены отечественными производителями, а также те из них, чье внедрение в микробиологическую практику признано перспективным.

Отечественные рекомендации в принципиальном плане мало отличаются от каждодневной практики применения питательных сред за рубежом. Питательные среды для энтеробактерий сконструированы таким образом, чтобы использовать ростовые особенности отдельных родов и видов и их способность конвертировать тот или иной субстрат. В следующей таблице 7 выборочно обобщены те свойства энтеробактерий, которые учтены и успешно реализованы в питательных средах для дифференциации микроорганизмов этого семейства.

Согласно рекомендациям Всемирной организации здравоохранения (1990 г.) в бактериологических лабораториях для работы с энтеробактериями рекомендованы следующие питательные среды:

транспортные среды –– Эймса, или Кери-Блейра, или Стюарта;

базовые среды – кровяной агар, агар на переваре сои (tryptic soy agar);

Заслуживает упоминания еще один зарубежный опыт.

В практике работы микробиологов США при выделении энтеробактерий из кишечного содержимого предложено использовать следующие группы питательных сред.

Как транспортную –– среду Кери-Блейра.

Дифференциально-диагностические : агар МакКонки и ЕМВ-агар (с эозином и метиленовым голубым).

Умеренно селективные : гектоен-энтеро агар, SS-агар (шигелла-сальмонелла агар), XLD-агар (с ксилозой, лизином и дезоксихолатом).

Высоко-селективные среды: агар с бриллиантовым зеленым и висмут-сульфит агар.

Естественно, что все перечисленное не исключает применения базовых питательных сред, прежде всего питательного агара с добавлением бараньих эритроцитов.

Назначение транспортной среды очевидно. Вторая группа сред позволяет отдифференцировать культуры, ферментирующие лактозу, от лактозонегативных. Следующая (умеренно селективная среда) обеспечивает рост сальмонелл и шигелл, в то время как рост других энтеробактерий частично или полностью подавляется. Последняя группа предназначена для выделения сальмонелл, но рост шигелл на них не гарантирован.

Питательные среды, наиболее часто используемые при выделении

Похожие документы:

Краткий курс лекций по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии Часть первая. Общая микробиология, вирусология и иммунология

. и др. Специальные питательные среды для культур клеток. Используются разнообразные синтетические вирусологические питательные среды сложного состава .

Методические указания для самостоятельной работы студентов под руководством преподавателя Тема: Возбудители инфекций, передающихся половым путем.

. . Параллельно проводится высев на соответствующие питательные среды для выделения и идентификации культуры. 4. . 2011. - 448 с., т.1 Зверев В.В., Бойченко М. Н. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: в 2 т.: учебник. - М.: ГЭОТАР .

Разработка и применение биологических моделей для изучения хронической туберкулезной инфекции 03. 02. 03 микробиология 03. 01. 06 Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

. -исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г. Н. Габричевского . высевов на плотные питательные среды, для дальнейшей работы был . А.В. Штанников , С.Ф. Бикетов // Проблемы медицинской и экологической биотехнологии (Сб. тез. докладов .

. Под редакцией доктора медицинских наук, профессора, зав. каф. микробиологии ГБОУ ВПО СОГМА . . Посев почвенной болтушки на среду Китта-Тароцци. Питательные среды для анаэробов, методы культивирования и выделение .

. верите? Почитайте учебник для медицинских Вузов по специальности «Здоровый . Санта-Русь, известным практикующим микробиологом А.С.Бессережновым. Знаете почему . не только служит отличной питательной средой для восстановления нормальной микрофлоры, но .


Транспортная система со средой CVTR (модифицированная) специально предназначена для сбора и транспортировки материала в лабораторию для выделения вирусов ( в том числе вируса "свиного" гриппа - А (H1N1 ).

Транспортная система представляет собой короткие, расположенные перпендикулярно к оси тампона, тонкие нейлоновые нити (щеточки) прикрепленные к гибкой пластиковой палочке, что позволяет эффективно проводить забор материала и тщательно высвобождать собранный материал в среду. Конструкция данного тампона позволяет собрать существенно больше материала для исследований и как следсвтие повысить чувствительность серологических и молекулярных методов обнаружения. Каждый тампон имеет точку перелом, предусмотренную конструкцией, что позволяет отделить тампон, не вынимая из пробирки.

Среда CVTR сделана на основе среды 199 и содержит белки-протекторы, антибиотки для подавления микробной контаминации и буфер для поддержания pH. Феноловый красный используется как pH-индикатор.

Состав:
Среда 199 для культур тканей
Бычий сывороточный альбумин
Полимиксин В
Гентамицин
Нистатин
Офлоксацин гидрохлорид
Сульфаметоксазол

Контроль качества:
Внешний вид: прозрачный раствор красного цвета
рН при 250С: 7.3 ±0,3


Стерильность: отсутствует рост бактерий и грибов после 14 дней инкубации в соответствии с USP спецификацией. Сбор образцов:Образцы должны быть собраны и обработаны, как рекомендуется в опубликованных протоколах. Приведенные ниже рекомендации позволяют правильно собрать материал.
Для полной диагностики вирусных заболеваний важно чтобы инфекционность вирусов сохранялась после сбора образца. Инфекционность вирусов снижается с течением времени и скорость снижения является функцией температуры. Стабильность образцов повышается при охлаждении поэтому их нельзя хранить при комнатной температуре. Вероятность успешного выделения выше, если материал обрабатывается сразу после забора и вирусов в нем много. Вирусная нагрузка максимальна если материал собран на ранних стадиях заболевания, сразу после появления клинических симптомов и до применения противовирусных препаратов.Забор материала:

  1. Вскрыть пакет и достать тампон.
  2. Материал может быть собран тампоном следующим способом.

Полость носаПробу со слизистых передних отделов полости носа собирают одним стерильным тампоном. Тампон вводят в правую ноздрю и вращательными движениями собирают материал с крыльев носа и верхнего угла носового отверстия. Повторяют манипуляцию для левой. Носоглотка Осторожно, вращательными движениями по нижнему носовому ходу поочередно в обе ноздри вводят в носоглотку тампон. Одновременно крылья носа прижимают к тампону и носовой перегородке для более плотного его контакта со слизистой оболочкой.ГорлоПопросить пациента открыть рот. Ввести тампон и взять материал в районе миндалин.

Транспортировка материала:
Материал должен быть доставлен в лабораторию максимально быстро. Собранный материал после его забора должен быть охлажден до 2–8 0С или транспортироваться при 2-8 0С в тающем льде в течение 48 часов. При длительной задержке транспортировки и оформления, материал должен перевозится в сухом льду, замороженный до –70 0С.Хранение и срок годности:
Транспортную систему со средой CVTR (модифицированной) хранить при 15–30 0С.
Гарантийный срок хранения – 1 год с даты производства.
Использовать до даты, указанной на упаковке.

Предостережение:

  1. Для максимально полного выделения вирусов из правильно собранного материала необходимо согласовывать по времени сбор материала и его обработку в лаборатории.
  2. Материал должен быть собран в острой фазе заболевания.
  3. Нельзя пользоваться транспортной системой если: среда изменила свой цвет (1), если есть очевидная утечка среды из пробирки (2), если есть другие признаки порчи транспортной системы (3).
  4. Для поддержания инфекционности вируса важно чтобы температура должным образом поддерживалась от забора материала до его исследования.
  5. Избегать размораживания – замораживания собранного материала.


Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку, содержащую среду и тампон на пластиковой палочке с пробкой для взятия мазка. бактериальные культуры гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при комнатной температуре.

Hiculture Transport Swabs W/ CVTR Medium (Modified) in polystyrene tube

Транспортная система со средой CVTR (для микоплазм, хламидий и вирусов) (модифицированная) в полистироловой пробирке с тампоном (для выделения вирусов, в том числе, коронавирус) (на основе среды 199, пригодна для ПЦР) (в комплекте два тампона- для носоглотки и горла)

РУ (ФСЗ 2009/03708)

Срок годности: 1 год с момента изготовления.

Комбинированная система предназначена для сбора и транспортировки клинических образцов от места сбора до лаборатории. Пригодна для ПЦР-исследований и для выделения вирусов, в том числе, коронавируса. Стерильная система содержит пробирку с 3мл транспортной среды HiViral на основе среды 199, предназначенной для поддержки широкого спектра вирусов, таких как коронавирус , вирус простого герпеса, аденовирус, вирус гриппа типа A (H1N1, H5N2, H3N2), респираторно-синцитиальный вирус, энтеровирус, вирус паротита и риновирус.

Комплект содержит:

- один вискозный стерильный тампон без точки перелома для взятия проб из носа или носоглотки.

- один вискозный стерильный тампон без точки перелома для взятия пробы позади миндалин.

Транспортировка биоматериала:

Материал должен быть доставлен в лабораторию максимально быстро. После забора его необходимо охладить до 2 - 8°С или транспортировать в тающем льду в течение 48 часов. При более длительной задержке материал должен сохраняться при температуре -70 °С.

Транспортная система сохраняется при температуре не выше 25 °С.

Среда Кэри-Блэра без угля используется для сбора и транспортировки клинического материала. Первоначально транспортная среда была предложена Stuart и соавт. для доставки в лабораторию материала, содержащего гонококки. Позже, для пересылки проб фекалий, Кэри и Блэр разработали новую среду, в которой было меньше питательных веществ, низкий окислительно-восстановительный потенциал и высокое значение рН. В этой среде минимум питательных веществ, чтобы сохранить максимальное количество живых бактерий без размножения. Тиогликолят натрия введен в состав среды для создания низкого окислительно-восстановительного потенциала. Среда имеет слабощелочное значение рН, что минимизирует гибель бактериальных клеток вследствие закисления среды.
Транспортная система со средой Кари-Блэйра в полистироловой пробирке рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения фекальных и ректальных проб, содержащих Salmonella spp., Shigella spp., Vibrio spp., Campylobacter spp., Pseudomonas spp., Escherichia coli и другие микроорганизмы.
Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку, со средой Cary-Blair и стерильный тампон для взятия мазка на пластиковой палочке с пробкой.
Бактериальные культуры гарантированно сохраняют жизнеспособность
до 48 часов при t° 15-22 °C.
Транспортные системы хранить при температуре не выше 25°C.
Не допускать замораживания.

Эта среда первоначально предложена Stuart для изучения гонококков. Позже среда Стюарта была модифицирована для транспортировки материала, содержащего гонококки. Затем в ее состав были введены тиогликолят натрия и уголь. Эти среды можно использовать для транспортировки многих требовательных микроорганизмов, включая анаэробов, т.к. на ней сохраняется жизнеспособность и не происходит существенного размножения микроорганизмов.
Благодаря составу среды можно быть уверенным, что присутствующие микроорганизмы выживут в течение относительно долгого времени. Эти среды имеют достаточную степень анаэробиоза, что можно контролировать по индикатору редокс-потенциала – метиленовому синему. После приготовления стерильная среда будет подвергаться окислению, начиная с верхней части, но если вся она станет голубой, ее не рекомендуется использовать. Натрия глицерофосфат и кальция хлорид придают среде буферные свойства и поддерживают оптимальное осмотическое давление.
Транспортная система со средой Стюарта в полистироловой пробирке рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения проб, содержащих Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumonie и другие микроорганизмы.
Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку, со средой Стюарта и стерильный тампон для взятия мазка на пластиковой палочке с пробкой.
Бактериальные культуры гарантированно сохраняют жизнеспособность
до 48 часов при t° 15-22 °C.
Транспортные системы хранить при температуре не выше 25°C.
Не допускать замораживания.

Amies модифицировал транспортную среду Stuart путем замены глицерофосфата на неорганический фосфатный буфер и добавления в среду активированного угля. В данном виде среда имеет низкий редокс-потенциал (за счет присутствия тиогликолята натрия и небольшого количества агар-агара). Уголь помогает нейтрализовать вещества, токсичные для некоторых возбудителей, например, гонококков. Соли кальция, магния, калия и натрия способствуют выживанию гонококков и поддерживают жизнеспособность других бактериальных клеток.
Данная среда является модификацией ранее предложенной среды Кэри-Блера и используется для транспортировки и хранения материала, предназначенного для микробиологического исследования. Исходная транспортная среда была предназначена для материала, содержащего гонококки. Кэри и Блер отметили избыточный рост на ней контаминирующих микроорганизмов из фекалий, содержащих шигеллы. Контаминирующие микроорганизмы использовали глицерофосфат для получения энергии и поэтому для придания буферных свойств лучше было использовать неорганические соли. В среде Амиеса нет метиленового синего.
Для выделения и идентификации микроорганизмов образец по возможности быстро и асептично извлекают из пробирки и делают посевы на соответствующих средах.
Транспортная система со средой Амиеса с углем или без угля в полистироловой пробирке рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения проб, содержащих E.coli, K.pneumoniae, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumonie и другие микроорганизмы.
Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку, со средой Амиеса с углем или без угля и стерильный тампон для взятия мазка на пластиковой или металлической палочке с пробкой.
Бактериальные культуры гарантированно сохраняют жизнеспособность
до 48 часов при t° 15-22 °C.
Транспортные системы хранить при температуре не выше 25°C.
Не допускать замораживания.

Hiculture-TM Transport Swabs w/CVTR Medium in polystyrene tube Recommended for transporting viral specimens at ambient temperature.

Транспортная система со средой CVTR в полистироловой пробирке с тампоном

Транспортная среда CVTV является модификацией транспортной среды Амиеса с активированным углем, предназначенной для сохранения и транспортировки образцов, предположительно инфицированных вирусами. Хлористый натрий и хлористый калий поддерживают сильное осмотическое давление в среде, в то время, как активированный уголь нейтрализует токсичные компоненты, содержащиеся в образце.
Транспортная система со средой CVTR в полистироловой пробирке рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения проб, содержащих вирусы ( для микоплазм, хламидий и вирусов) (кроме распираторных вирусов). Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку, со средой CVTR и стерильный тампон для взятия мазка на пластиковой палочке с пробкой.
Вирусы гарантированно сохраняют жизнеспособность до 96 часов при t° 15-22 °C (например, аденовирус D человека в культуре клеток линии BHK).
Транспортные системы хранить при температуре не выше 25°C.
Не допускать замораживания.

Рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения проб, содержащих анти­сеп­тики и дезинфектанты (обработанные антисептиками раны, поверхности в операционных, роддомах и т. д.)

Может быть использована для оценки качества обработки поверхностей антисептиками и дезинфектантами. Состав среды содержит компоненты, нейтрализующие широкий спектр антисептиков и дезинфектантов. Обеспечивает сохранение энтеробактерий, P seudomonas, Staphylococci , Candida и других микроорганизмов, а также Mycoba cterium tuberculosis и других микобактерий (МУ 3.5.2596-10). Микроорганизмы гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при комнатной температуре.

Hiculture Transport Swabs w/Dey-Engley Neutralizing Broth with metal stick Транспортная система с нейтрализующей средой Ди-Ингли в полистироловой пробирке с тампоном на металлической палочке

Рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения проб, содержащих анти­сеп­тики и дезинфектанты (обработанные антисептиками раны, поверхности в операционных, роддомах и т. д.)

Может быть использована для оценки качества обработки поверхностей антисептиками и дезинфектантами. Состав среды содержит компоненты, нейтрализующие широкий спектр антисептиков и дезинфектантов. Обеспечивает сохранение энтеробактерий, P seudomonas, Staphylococci , Candida и других микроорганизмов, а также Mycoba cterium tuberculosis и других микобактерий (МУ 3.5.2596-10). Микроорганизмы гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при комнатной температуре.

Транспортная система со средой для грибов рода Candida рекомендуется для сохранения и транспортировки клинических образцов, содержащих грибы рода Candida.
Среда приготовлена в соответствии с прописью Nickerson и Mankowski.
Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку со средой для грибов рода Candida и стерильный тампон для взятия мазка на пластиковой палочке с пробкой.
Грибы рода Candida гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при t° 15-22 °C.
Транспортные системы хранить при температуре не выше 25°C.
Не допускать замораживания.

Рекомендуется для транспортировки и хранения клинического материала, содержащего кампилобактерии. Модифицированная тиогликолевая среда содержит необходимые питательные вещества для сохранения и селективного восстановления таких микроорганизмов, как Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Escherichia coli и др.
Транспортная система с модифицированной тиогликолевой средой для кампилобактерий в полистироловой пробирке рекомендуется для сбора, транспортировки и хранения проб, содержащих кампилобактерии. Каждая упаковка содержит стерильную полистироловую пробирку с модифицированной тиогликолевой средой и стерильный тампон для взятия мазка на пластиковой палочке с пробкой.
Кампилобактерии гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при t° 15-22 °C.
Транспортные системы хранить при температуре не выше 25°C.
Не допускать замораживания.

Условия и сроки хранения:

хранить при температуре +2 - 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке.

Читайте также: