Посев на гарднереллу инвитро
Обновлено: 05.10.2024
Качественное определение ДНК Gardnerella vaginalis методом ПЦР.
Гарднереллёз (бактериальный вагиноз), чаще выявляется у женщин детородного возраста. Заболевание возникает как следствие резкого нарушения баланса микрофлоры влагалища: преобладающие в норме лактобактерии замещаются анаэробными микроорганизмами. Гарднереллёз может являться причиной осложнений беременности: воспалительных заболеваний, маточных кровотечений, послеродового эндометрита, пневмонии у новорождённых.
Аналитические показатели: выявление ДНК гарднереллы в клинических образцах методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
- определяемый фрагмент - участки последовательности гена белка 16S гарднереллы;
- специфичность обнаружения - 100%;
- чувствительность анализа - не менее 100 молекул ДНК микроорганизма в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробы.
За 24 часа до процедуры необходимо воздержаться от применения всех видов (свечи, мази, спринцевания) местных лекарственных форм (бактерицидные и бактериостатические средства, контрацептивы и т. п.) и средств интимной гигиены, содержащих бактерицидные добавки.
- Обильные однородные кремообразные влагалищные выделения серовато-белого цвета, прилипающие к стенкам влагалища.
- Выделения неприятного (рыбного) запаха, который возникает в результате распада аминов, вырабатываемых анаэробными бактериями.
- Воспалительный процесс во влагалище.
- Вульвовагинальное раздражение в виде зуда и жжения, а также неприятные ощущения при половом акте.
- Изменение гормонального статуса.
- Снижение иммунологической реактивности.
- Нарушение микробиоценоза кишечника.
- Предшествующая антибактериальная терапия.
- Перенесённые и сопутствующие воспалительные заболевания мочеполового тракта.
- Применение гормональных средств, иммунодепрессантов.
Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: качественный тест (отрицательно / положительно).
Референсные значения: отрицательно.
Комментарий: к положительным результатам на гарднереллу столь высокочувствительного метода как ПЦР на ДНК Gardnerella vaginalis надо относится адекватно, поскольку часть женщин, не страдающих бактериальным вагинозом имеют высокий уровень этих микробов во влагалищном секрете.
Гарднереллёз (бактериальный вагиноз) чаще выявляется у женщин детородного возраста. Заболевание возникает как следствие резкого нарушения баланса микрофлоры влагалища: преобладающие в норме лактобактерии замещаются анаэробными микроорганизмами. Гарднереллёз может являться причиной осложнений беременности: воспалительных заболеваний, маточных кровотечений, послеродового эндометрита, пневмонии у новорождённых.
- определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК Gardnerella vaginalis, кодирующий синтез 16S рРНК микроорганизма;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность определения – 100 копий ДНК Gardnerella vaginalis в образце.
Следует собирать первую утреннюю порцию мочи в количестве 20-30 мл в стерильный флакон. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>
- Обильные однородные кремообразные влагалищные выделения серовато-белого цвета, прилипающие к стенкам влагалища.
- Выделения неприятного (рыбного) запаха, который возникает в результате распада аминов, вырабатываемых анаэробными бактериями.
- Воспалительный процесс во влагалище.
- Вульвовагинальное раздражение в виде зуда и жжения, а также неприятные ощущения при половом акте.
- Изменение гормонального статуса.
- Снижение иммунологической реактивности.
- Нарушение микробиоценоза кишечника.
- Предшествующая антибактериальная терапия.
- Перенесённые и сопутствующие воспалительные заболевания мочеполового тракта.
- Применение гормональных средств, иммунодепрессантов.
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
ГлавнаяHelixbook Посев на Gardnerella vaginalis с определением титра и чувствительности к противомикробным препаратам
Микробиологическое исследование, позволяющее выявить в биоматериале возбудителей бактериального вагиноза (гарднереллеза) – G. vaginalis – и определить их чувствительность к антибиотикам.
Синонимы русские
Посев на гарднереллез с определением титра и чувствительности к антибиотикам.
Синонимы английские
G. vaginalis, culture.
Метод исследования
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Женщинам рекомендуется сдавать урогенитальный мазок до менструации или через 2-3 дня после ее окончания.
Общая информация об исследовании
Бактерии Gardnerella vaginalis (син. Haemophilus vaginalis, Corynebacterium vaginalis) представляют условно-патогенную микрофлору влагалища. Они являются наиболее частой причиной бактериального вагиноза – проявления дисбиоза микрофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста. Бурное размножение гарднерелл приводит к вытеснению преобладающих во влагалище при норме Lactobacillus spp. и стимулирует избыточный рост анаэробных бактерий и микоплазм. Риск развития гарднереллеза увеличивают вагинальные спринцевания, использование внутриматочных спиралей, многочисленные половые связи, хламидийная или гонококковая инфекция и т. д.
У женщин гарднереллез может протекать бессимптомно или с умеренными (либо обильными) выделениями из влагалища серого или грязно-белого цвета, часто с "рыбным" запахом, особенно после незащищенного полового акта, зуда и жжения во влагалище, при этом признаки воспаления, как правило, отсутствуют. Гарднереллез способствует развитию воспалительных заболеваний органов малого таза, в том числе после аборта, а у беременных женщин является причиной хорионамнионита (воспаления плодных оболочек), выкидышей во 2-м триместре беременности, преждевременных родов и рождения детей с низким весом, а также развития эндометрита (воспаления слизистой оболочки матки). Если G. Vaginalis попадают в мужской организм, то они чаще всего гибнут в течение 2-3 дней, реже возникает бессимптомное носительство. Крайне редко гарднереллы являются причиной развития уретритов, простатитов или эпидидимитов у мужчин.
Для выявления G. vaginalis и определения их чувствительности к противомикробным препаратам используется метод культивирования на питательных средах (посев).
Для чего используется исследование?
- Для диагностики гарднереллеза.
- Для выбора рациональной антибактериальной терапии и оценки ее эффективности.
- Для дифференциальной диагностики (наряду с другими исследованиями) заболеваний, протекающих со сходными симптомами.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на гарднереллез (бактериальный вагиноз).
- После завершения антибактериальной терапии гарднереллеза.
- При планировании беременности.
- При невынашивании беременности или осложненном течении беременности и родов.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Выявление G. vaginalis в большом количестве (более 10 4 КОЕ/мл) в сочетании с клиническими признаками бактериального вагиноза свидетельствует о том, что возбудителем заболевания является именно G. vaginalis.
Рост G. vaginalis в количестве менее 10 4 КОЕ/мл не может расцениваться как причина заболевания.
Наличие в исследуемом образце ДНК гарднереллы методом ПЦР – весьма информативный анализ.
Для мужчин и для женщин ПЦР нужно делать если:
- снижается иммунологическая реактивность в организме
- нарушается микробиоценоз в кишечнике
- недавно проводилась антибактериальная терапия
- если накануне были заболевания мочеполовой системы
- применялись гормональные препараты и иммунодепрессанты
Конечно, исходя из второго названия гарднереллеза – бактериальный вагиноз, правильней бы считать гарднереллёз женским заболеванием.
В принципе, так оно и есть.
Мужской иммунитет, как правило, справляется с гарднереллой.
Мы позже поговорим, как может проявляться заболевание у мужчин.
На фоне гонореи и хламидиоза гарднереллёз бурно развивается.
Проведение анализа ПЦР делается на материале соскоба из вагины или из мочеиспускательного канала у мужчин.
Такой анализ обязательно делается при симптоматике заболевания.
Такой анализ необходим, если женщина планирует беременность, и, особенно, если в анамнезе были выкидыши.
Этим анализом оценивают и эффективность лечения от проявлений гарнереллёза.
ДНК в методе исследования ПЦР
У ПЦР диагностики есть главное преимущество – невероятная точность.
Практически, безошибочно, можно определить характерное для данного возбудителя ДНК, всего лишь по одной молекуле.
ПЦР-анализ очень универсален, для его проведения подходит любой биоматериал – кровь, моча, слюна, клетки кожи, соскобы, мазки и тому подобное.
ПЦР диагностика обладает широким охватом, диагностируя один биоматериал, определяют ДНК сразу нескольких возбудителей.
Методом ПЦР определяют возбудителя болезни достаточно быстро, в течение пяти-семи часов.
Стоимость ПЦР-диагностики сопоставима с другими методами анализов.
Но для его проведения нужна чистота при заборе биоматериала и высокая квалификация медперсонала, проводящего исследование.
Иначе результат исследования будет недостоверный.
Количественный ПЦР на гарднереллу с расшифровкой
Количественный анализ методом ПЦР делают для определения в слизи со слизистой оболочки вагины ДНК гарднереллы и ее количества.
Это необходимо, чтобы определить, достаточно ли количества гарднерелл для развития клинических проявлений.
Оценивается и бессимптомное бактерионосительство.
Накануне (в течение двух дней перед сдачей биоматериала на анализ) запрещена интимная близость в виде сексуальных контактов.
Подмываться можно только чистой водой, без средств интимной гигиены.
Нельзя пользоваться интравагинальными спринцовками.
День, когда берется биоматериал на ПЦР, вообще, без никаких гигиенических процедур интимного характера.
Менструация – не лучшее время для сдачи анализа, должно пройти 3 дня после ее окончания.
Гарднерелла вагиналис относится к анаэробно-факультативным микроорганизмам, которые всегда в небольшом количестве есть во влагалище здоровой женщины.
Если снижается иммунная защита под действием различных эндогенных и экзогенных факторов – возникает гарднереллёз.
Если содержание геномного эквивалента в одном миллилитре меньше или равно ста четырём единицам, то гарднереллёза нет.
Если равно и больше ста пяти – значит гарднереллёз – есть.
ПЦР делается максимум два дня.
Где и когда делают ПЦР на гарднереллу и его стоимость
За разработку метода анализа полимеразной цепной реакции (ПЦР), американский биохимик Кэри Мулис был удостоен Нобелевской премии в 1993 году.
Сегодня этот метод диагностики нашел большое практическое применение.
Его применяют для диагностики и оценки эффективности лечения различных инфекций, в том числе и гарднереллы.
Анализ методом ПЦР проводят в специализированных лабораториях, в котором есть специальный прибор – амплификатор и специалисты, умеющие на нём работать
Про менструации уже упоминалось: можно сдавать мазки на гарднереллу методом ПЦР и до их начала.
Мужчины не мочатся в течение двух трех часов перед взятием соскоба из мочеиспускательного канала.
Для исследования берутся не только мазки, но и моча.
Анализ ПЦР относительно недорогой, в среднем порядка 300-500 рублей.
У какого врача сдавать анализ ПЦР на гарднереллу
Гарднерелла не ИППП, поэтому гарднереллёз лечится у гинеколога женский и уролога – мужской.
Именно эти врачи направляют больных на исследование биоматериала на гарднереллу методом ПЦР.
Правильней говорить не гарднереллёз, а бактериальный вагиноз, поскольку при воспалении во влагалище растёт количество не только гарднереллы, но и других анаэробов.
Гарднерелёза нет даже в МКБ-10.
О бактериальном вагинозе мы говорим, как о заболевании с полимикробной этиологией.
ПЦР на гарднереллу норма
Для варианта нормы мы оцениваем референсные значения, это когда количество гарднереллы в пределах одиночных особей.
Интерпретация результатов и определение нормы проводится только врачом с учётом индивидуальных особенностей пациента.
Бактериальный вагиноз возникает:
- если нарушен гормональный фон внутри влагалища
- если имеется иммунодефицитное состояние типа ВИЧ-инфекции
- от дисбактериоза в кишечнике
- от последствий антибактериальной и гормональной терапии
- от приёма контрацептивных препаратов
- от других воспалительных заболеваний гениталий
- от длительного применения спермицидов
- если есть внутриматочная спираль
- если проводились частые спринцевания и тому подобное
ПЦР на гарднереллу у мужчин
Мужской гарднереллёз протекает в виде скудных выделений из мочеиспускательного канала (зеленоватых), зуда и жжения во время опорожнения мочевого пузыря.
Чаще заболевание у мужчин, вообще, бессимптомное или малосимптомное.
Даже если гарднереллёз бессимптомный, то мужчина все равно переносчик патогенной гарднереллы.
Иногда у мужчин нет особого дискомфорта, и гарднереллёз проходит сам собой.
Если иммунная система слабая, то гарднерелла грозит мужчинам не только уретритом, но и простатитом и эпидидимитом.
У диагностики гарднереллеза методом ПЦР высокая чувствительность и специфичность до девяноста восьми процентов.
Принцип метода ПЦР лежит в том, что идентифицируется уникальный фрагмент ДНК гарднереллы вагиналис, после репликации исследуемого биоматериала в стеклянной посуде с помощью амплификатора.
ПЦР на гарднереллу у женщин
Женский гарднереллёз более выраженный.
Хотя, по статистике, у пятидесяти процентов болеющих гарднереллёзом женщин отмечают бессимптомное его течение.
Когда гарднереллы начинают бурно размножаться, они вытесняют из полости вагины лактобациллы.
Это стимулирует избыточное размножение анаэробной микрофлоры и микоплазменной инфекции.
В результате развивается бактериальный вагиноз.
Выделения из вагины сероватые или беловатые с запахом рыбы.
Запах усиливается, после сексуального контакта без презерватива.
Иногда влагалище зудит, и беспокоит чувство жжения.
Признаков воспаления нет.
При гарднереллёзе у беременных женщин мы наблюдаем наличие цитокинов и других вредных веществ, вызванных присутствием гарднереллы вагиналис и инфицированием околоплодной жидкости.
Плодные оболочки воспаляются, что грозит выкидышем (второй триместр беременности), преждевременными родами или рождением недоразвитых детей с низкой массой тела.
Слизистая оболочка полости матки тоже воспаляется.
ПЦР на гарднереллу у женщин - важный диагностический анализ.
С помощью ПЦР проводят не только диагностику, но и дифференциальную диагностику с заболеваниями со сходной симптоматикой.
Определение ДНК гарднереллы, со сто процентной уверенностью, дает метод ПЦР.
Контроль ПЦР после лечения гарднереллы
С помощью метода ПЦР можно не только диагностировать гарднереллёз, но и контролировать результат лечения от него, насколько эффективным оно было.
Удалось ли после лечения полностью освободиться от повышенного количества гарднереллы вагиналис?
Или лечение было неэффективным и нужна другая схема лечения и другие препараты?
Метод ПЦР-диагностики можно проводить столько раз, сколько будет необходимо для контроля качества лечения.
Так как ПЦР – это не серологический метод исследования, то есть не зависящий от титра антител, то его проводят сразу после лечения.
ПЦР-метод диагностики очень информативный и точный.
Количественный ПЦР говорит о степени активности гарднереллы и подсказывает дальнейшие направления лечения.
Влияние на суставы хронического гарднереллёза
Гарднереллез в хронической форме приводит к поражениям в суставах за счёт генетической агрессии иммунной системы.
Поэтому необходимо лечить гарднереллёз в самой начальной стадии, чтобы не допустить отдалённых последствий с иммунной системой.
По сути – поражение суставов при гарднереллёзе это явления реактивного артрита.
Чем быстрее вылечивается гарднереллёз, тем меньше негативных последствий для других органов, в том числе и для костно-суставного аппарата.
Причины гарднереллёза
Есть следующие причины повышения фрагментов ДНК гарднереллы вагиналис:
- учащенная смена сексуального партнера
- антибиотикотерапия
- частое спринцевание, по несколько раз в день
- некачественные продукты интимного свойства
- частые визиты в баню, сауну или спортивный зал
- психоэмоциональные нагрузки
- индивидуальное синтетическое белье
- повышенная влажность в помещении
- инфекционные болезни различной этиологии
- наличие слабой иммунной защиты
И, вообще, любые причины, приводящие к иммуннодефицитными состояниям, только повышают возможности для развития гарднереллёза.
Правила проведения ПЦР диагностики на гарднереллу
Рассмотрим более подробно, в чем же лежит принцип проведения полимеразной цепной реакции.
Определенный участок ДНК с нуклеиновыми кислотами многократно избирательно копируются.
Для этого используются специальные ферменты и специальные условия в амплификаторе.
Но при этом копируется участок ДНК, удовлетворяющий требуемым параметрам и только в том случае, если он есть в исследуемом материале.
При помощи ПЦР копируются только небольшие части ДНК.
Обычный ПЦР-процесс происходит с биоматериалом с ДНК-участками для копирования длиной около трёх тысяч пар оснований нуклеиновых кислот.
В процессе проведения полимеразной ценной реакции длина фрагмента ДНК увеличивается до двадцати – сорока тысяч пар.
Для примера, длина ДНК хромосомы порядка трёх миллиардов, так что их нельзя перепутать при анализе.
Для проведения ПЦР-диагностики нужен специальный прибор – амплификатор.
Для обеспечения периодического охлаждения и нагревания пробирок с исследуемым биоматериалом.
Чтобы реакция копирования проходила успешно.
При проведении ПЦР таких циклов копирования ДНК происходит порядка двадцати – тридцати пяти, по три стадии каждый цикл.
Ложноположительный и ложноотрицательный результат ПЦР при гарднереллёзе
При диагностике наличия гарднереллы, как и других микроорганизмов, методом ПЦР возможно произвести ошибки. Они приводят к ложноположительным или ложноотрицательным результатам.
Такие ошибки делятся на присущие:
- преаналитическому этапу
- аналитическому этапу
- постаналитическому этапу
На преаналитическом этапе можно взять биоматериал не из того места или неправильно его хранить.
Во время аналитического этапа, можно по неаккуратности занести неприсущее биоматариалу ДНК, что приведет к неправильному результату.
На постаналитическом этапе возможна неправильная трактовка результатов анализов.
Поэтому, чтобы ПЦР анализ был всегда правильным, очень важно правильно и аккуратно брать биоматериал на анализ, правильно проводить сам анализ и научиться правильно оценивать его результаты.
Такой анализ нужно делать в достойной лаборатории и достойными специалистами.
Это позволит получить результат, в котором будешь уверен.
Для сдачи анализа ПЦР на гарднереллу обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
Читайте также: