Посев на пептонную воду

Обновлено: 08.07.2024

жидкая питательная среда, состоящая из 0,5-1% пептона, 0,5% натрия хлорида, растворенных в дистил. воде. Применяют как среду обогащения для холерного вибриона (рН около 9), основу для приготовления сахарных (рН 7,4) и др. сред. Стерилизуют П. в. при 120°С в течение 20 мин.

Смотреть что такое "Пептонная вода" в других словарях:

ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ — ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ, искусственные среды того или иного состава, предназначенные для культивирования микробов и простейших в лабораторных условиях. Впервые были введены для изолирования отдельных видов бактерий Р. Кохом в 1881 году, что создало… … Большая медицинская энциклопедия

ХОЛЕРА — ХОЛЕРА. Содержание: История. 265 Холера в России и СССР . 269 Этиология. • . •. 272 Эпидемиология X. 278 Географическое распространение и статистика 281 Патологическая анатомия … Большая медицинская энциклопедия

Питательные среды для бактерий — Под этим именем подразумевают различного рода субстраты, приготовляемые для изучения жизнедеятельности микроорганизмов при определенных условиях, изменяемых по воле экспериментатора. Микрохимические анализы и опыты искусственной культуры выяснили … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона

Питательные среды бактериологические — жидкие, полужидкие или плотные субстраты, используемые для выращивания микроорганизмов в лабораторных или производственных условиях. Используют для выделения чистых к р бактерий, грибов и простейших из биогенных или абиогенных объектов, для… … Словарь микробиологии

СРЕДЫ ПИТАТЕЛЬНЫЕ — среды питательные, субстраты, используемые для культивирования в искусственных условиях микроорганизмов и культур тканей. В микробиологической практике С. п. широко применяют для постановки лабораторного диагноза инфекционных заболеваний, для… … Ветеринарный энциклопедический словарь

Пита́тельные сре́ды — субстраты, состоящие из компонентов, обеспечивающих необходимые условия для культивирования микроорганизмов или накопления продуктов их жизнедеятельности. Питательные среды различаются по назначению, консистенции и составу. По назначению их… … Медицинская энциклопедия

Посев (микробиология) — У этого термина существуют и другие значения, см. Посев. Культура микобактерий на яичной среде Левенштейна Йенсена … Википедия

Питательная среда — Питательная среда вещество или смесь веществ, применяемая для культивирования макро и микроорганизмов. Существует множество стандартных биологических питательных сред. Содержание 1 Требования, предъявляемые к средам 2 Классификация … Википедия

жидкая культуральная среда — 3.3.3.1 жидкая культуральная среда: Культуральная среда, состоящая из водного раствора одного или более компонентов (например, пептонная вода, питательный бульон). Примечания 1 В некоторых случаях к жидкой культуральной среде добавлены твердые… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

В пептонная вода Это жидкая неселективная среда обогащения, используемая в основном в качестве разбавителя для образцов пищевых продуктов или других материалов. Эта среда с химической точки зрения очень проста, она содержит мясной пептон, хлорид натрия и воду.

Имеет определенную пищевую ценность, позволяющую обогатить пробу. Если есть бактерии, которыми злоупотребляют, эта среда может восстановить жизнеспособность. Это особенно полезно для восстановления бактерий, принадлежащих к семейству Enterobacteriaceae.

В случае выздоровления сальмонелл рекомендуется использование буферной пептонной воды; Это служит средством предварительного обогащения образца, в этом случае он содержит другие элементы, такие как динатрийфосфат и дикалийфосфат.

Обычно пептонную воду готовят при нейтральном pH, однако существуют и другие варианты, когда необходимо, чтобы pH составлял 8,5 ± 0,2 (щелочной), потому что выделяемая бактерия является щелочной, например Vibrio cholerae.

Кроме того, эту среду можно использовать в качестве базовой среды для тестов на углеводное брожение.

Основа

Пептоны обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста бактерий, особенно азот и короткоцепочечные аминокислоты, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Кроме того, среда позволяет диспергировать, гомогенизировать и восстанавливать бактериальные клетки, поврежденные промышленными процессами.

В качестве разбавителя он идеален, эффективно заменяя физиологический раствор (SSF) или фосфатный буферный раствор (PBS).

Рост бактерий очевиден, наблюдая за их помутнением.

Подготовка

Домашнее приготовление (не коммерческое)

Отвесить 1 г пептона и 8,5 г хлорида натрия, растворить в 1 л дистиллированной воды. Уровень pH должен быть доведен до 7,0. Для этого можно использовать 1 н. Хлорид натрия.

Приготовление на коммерческой среде

Взвесить 15 г обезвоженной среды и растворить в литре дистиллированной воды. Смесь гомогенизируйте. При необходимости смесь кипятят в течение 1 минуты для полного растворения. При необходимости подавайте во флаконах по 100 мл или пробирках по 10 мл. Автоклав при 121 ° C в течение 15 минут.

Остудить и использовать или хранить в холодильнике. Конечный pH среды составляет 7,2 ± 0,2.

Цвет дегидратированной среды светло-бежевый, а приготовленная среда - светло-янтарный.

Подготовка к испытаниям ферментации

К предыдущему препарату - перед стерилизацией - необходимо добавить углевод до конечной концентрации 1% плюс индикатор Андраде (кислый фуксин) или феноловый красный (0,018 г / л). Трубки должны быть оснащены колоколом Дарема для наблюдения за образованием газа.

Другие варианты пептонной воды

- Буферная или забуференная пептонная вода

Он содержит ферментативный гидролизат казеина, хлорид натрия, дигидрофосфат калия и додекагидрат гидрофосфата натрия. Конечный pH составляет 7,0 ± 0,2.

Для его приготовления отвешивают 20 г обезвоженной среды и растворяют в 1 литре дистиллированной воды. Дайте ему отдохнуть примерно 5 минут. Нагрейте 1 минуту до полного растворения.

При необходимости разлить по подходящим банкам. Стерилизовать в автоклаве при 121 ° C в течение 15 минут.

-Щелочная пептонная вода

Взвесить 25 г обезвоженной среды и растворить в 1 литре воды. Действуйте, как описано выше. PH колеблется от 8,3 до 8,7.

Использовать

Посевной материал делается путем непосредственного размещения образца.

Он используется для разбавления образцов, особенно когда есть подозрения, что там могут быть поврежденные бактерии. Обычно разведения составляют 1:10 и 1: 100.

Инкубируйте 24 часа при аэробиозе при 35-37 ° С.

Образцы стула

Для образцов стула на сальмонеллу рекомендуется использовать забуференную воду в качестве среды предварительного обогащения.

Для этого действуйте следующим образом:

Если стул образовался, возьмите 1 г пробы. Если они жидкие, возьмите 1 мл стула и поместите в пробирку с 10 мл буферизованной пептонной воды. В случае ректальных мазков слейте материал, содержащийся в тампоне, в пробирку с забуференной пептонной водой.

Во всех случаях тщательно перемешайте и гомогенизируйте образец.

Образцы еды

Пептонная вода используется как среда для обогащения или как простой разбавитель, но при поиске разновидностей Salmonella ее используют в качестве среды предварительного обогащения, как уже было описано.

В еде действуйте следующим образом:

Для твердых продуктов отмерьте 25 г образца, а для жидких продуктов - 25 мл. Поместите указанную порцию в колбы, содержащие 225 мл пептонной воды. Перемешайте и гомогенизируйте образец.

Если предполагается, что микробная нагрузка высока, могут быть выполнены серийные или десятичные разведения для облегчения подсчета колониеобразующих единиц (КОЕ).

Количество разведений будет зависеть от типа образца и опыта аналитика.

Если же, с другой стороны, предполагается, что микробная нагрузка очень мала, разведения не требуются. Впоследствии субкультивирование на селективных носителях.

В случае еды из моря, такой как моллюски, рыба, среди прочего, в поисках Холерный вибрион или других разновидностей Vibrio, следует использовать пептонную воду с pH 8,5 (щелочная пептонная вода).

QA

Из каждой приготовленной партии от одной до двух пробирок следует инкубировать без инокуляции в течение 24 часов в условиях аэробиоза при 37 ° C. По прошествии времени не должно наблюдаться помутнения или изменения цвета.

Известные контрольные штаммы также можно использовать для оценки их эффективности:

Для этого можно использовать следующие штаммы бактерий: кишечная палочка ATCC 25922, кишечная палочка ATCC 8927, Золотистый стафилококк ATCC 6538, Синегнойная палочка ATCC 9027, Сальмонелла тифимуриум ATCC 1428, Сальмонелла энтеритидис ATCC 13076.

Во всех случаях ожидается удовлетворительное развитие микробов, о чем свидетельствует помутнение среды.

Ограничения

-Обезвоженная среда очень гигроскопична, поэтому ее необходимо беречь от влаги.

-Не используйте среду, если наблюдается какое-либо ухудшение качества.

-Обезвоженная питательная среда должна храниться при температуре от 10 до 35 ° C.

Читайте также: