Бокс для посевов в микробиологии

Обновлено: 05.10.2024

ГОСТ Р ЕН 12469-2010

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К БОКСАМ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ

Biotechnology. Performance criteria for microbiological safety cabinets

Дата введения 2011-12-01

Предисловие

1 ПОДГОТОВЛЕН Общероссийской общественной организацией "Ассоциация инженеров по контролю микрозагрязнений" (АСИНКОМ) и ЗАО "Ламинарные системы" на основе собственного перевода на русский язык европейского стандарта, указанного в пункте 4

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 184 "Обеспечение промышленной чистоты"

4 Настоящий стандарт идентичен европейскому стандарту ЕН 12469:2000* "Биотехнология. Технические требования к боксам микробиологической безопасности" (EN 12469:2000 "Biotechnology - Performance criteria for microbiological safety cabinets", IDT).

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных европейских стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации и межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июль 2019 г.

Введение

Боксы микробиологической безопасности предназначены для уменьшения риска заражения оператора во время работы с опасными или потенциально опасными микроорганизмами. Боксы не защищают оператора от всех видов опасности. Некоторые виды боксов также защищают материалы, с которыми ведутся работы, от загрязнений окружающей среды.

1 Область применения

Настоящий стандарт содержит основные рекомендации для боксов микробиологической безопасности (БМБ) с учетом норм безопасности и гигиены, устанавливает минимум технических требований к БМБ для работы с микроорганизмами и дает описание процедуры контроля БМБ с учетом защиты оператора и окружающей среды, защиты продукта от перекрестных загрязнений.

Стандарт не устанавливает требований к электрической, химической, радиоактивной и другим видам безопасности, которые даны в [1], [2] и [3].

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения).

EN 1822-1, High efficiency air filters (EPA, HEPA and ULPA) - Part 1: Classification, performance testing, marking (Высокоэффективные фильтры очистки воздуха ЕРА, HEPA и ULPA. Часть 1. Классификация, методы испытаний, маркировка)

EN 12296, Biotechnology - Equipment - Guidance on testing procedures for cleanability (Биотехнология. Оборудование. Методы контроля эффективности очистки)

EN 12297, Biotechnology - Equipment - Guidance on testing procedures for sterilizability (Биотехнологии. Оборудование. Руководство по процедуре испытаний для контроля стерилизуемости)

EN 12298, Biotechnology - Equipment - Guidance on testing procedures for leaktightness (Биотехнология. Оборудование. Руководство по процедурам испытаний на герметичность)

EN 13091, Biotechnology - Performance criteria for filter elements and filtration assemblies (Биотехнология. Критерии эксплуатационных характеристик для фильтрующих элементов и фильтров)

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 фактор защиты рабочего проема () (aperture protection factor, ): Отношение концентрации аэрозоля на внешней стороне рабочего проема к концентрации аэрозоля, диспергированного внутри бокса.

3.2 перекрестные загрязнения (cross contamination): Непреднамеренное попадание загрязнений химического или микробиологического характера с одного материала или продукта на другой материал или продукт.

3.3 бокс микробиологической безопасности, БМБ (microbiological safety cabinet, MSC): Вентилируемое ограниченное пространство, предназначенное для обеспечения защиты оператора и окружающей среды от аэрозолей, возникающих вследствие работы с потенциально опасными и опасными микроорганизмами, с помощью удаления воздуха в атмосферу путем фильтрации.

3.4 БМБ класса I (MSC class I): БМБ с рабочим проемом, через который оператор может проводить манипуляции внутри бокса. Бокс должен быть сконструирован таким образом, чтобы обеспечить защиту оператора от выброса диспергированных контаминированных частиц, образовавшихся внутри бокса. Это достигается с помощью направленного внутрь бокса через рабочий проем воздушного потока с последующей его фильтрацией и удалением из бокса.

3.5 БМБ класса II (MSC class II): БМБ с рабочим проемом, через который оператор может проводить манипуляции внутри бокса. Бокс должен быть сконструирован таким образом, чтобы оператор был защищен, риск загрязнения продукта и перекрестного загрязнения был низок, а удаление возникающих загрязнений обеспечивалось с помощью профильтрованного воздушного потока, циркулирующего внутри бокса, а также с помощью фильтрации удаляемого из бокса воздуха.

Примечание - Обычным способом обеспечения защиты является создание однонаправленного нисходящего ламинарного воздушного потока внутри бокса и воздушной завесы в рабочем проеме.

3.6 БМБ класса III (MSC class III): БМБ, в котором рабочая зона полностью изолирована, а оператор отделен от рабочего места физическим барьером (т.е. перчатки механически соединены с боксом). Профильтрованный воздух постоянно поступает в бокс, а удаляемый из БМБ воздух фильтруется для предотвращения попадания микроорганизмов в окружающую среду.

1 Соответствующие требования этого стандарта для БМБ класса III следует применять при их изготовлении на основе жестких или гибких конструкционных материалов. Другие данные по конструкционным материалам приведены в [4].

2 Бокс может иметь по крайней мере две последовательные ступени фильтрации, оснащенные высокоэффективными воздушными фильтрами, для удаления воздуха через вытяжную систему бокса в окружающую среду.

3.7 защита продукта (product protection): Способность БМБ предотвращать аэрозольное загрязнение продукта из окружающей среды через рабочий проем.

3.8 эффективность удержания (retention efficiency): Способность воздушного барьера удерживать микроорганизмы и/или аэрозоль, выражаемая отношением концентраций индикаторного аэрозоля внутри рабочего объема бокса и в окружающей среде.

Примечание - Для БМБ безопасность оператора, среды и продукта достигается различными видами барьеров, такими как корпус, фильтры или соответствующее направление потока. Функцией таких барьеров является предотвращение или минимизация перемещения микроорганизмов/аэрозолей между смежными пространствами, разделенными барьером. В зависимости от цели проводимой работы контролируемым объектом могут служить рабочая зона бокса, воздушный поток, поступающий на фильтр, или окружающая среда лабораторного помещения.

3.9 рабочая зона (working place): Часть внутреннего пространства бокса, в которой проводятся операции.

4 Виды биологической опасности

Необходимо учесть возникновение следующих видов биологической опасности:

- проникновение микроорганизмов во время работы, например, через рабочий проем, вытяжной воздуховод, воздуховод или корпус;

- выделение микроорганизмов во время демонтажа или технического обслуживания, например при замене фильтра или частей бокса, вследствие ненадлежащей стерилизации;

- высвобождение микроорганизмов при удалении загрязненного материала из бокса вследствие перекрестного загрязнения или загрязнения от продукта.

5 Виды исполнения БМБ

5.1 Виды исполнения БМБ по герметичности

Виды исполнения боксов по герметичности представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Виды исполнения боксов по герметичности

Вид исполнения по герметичности. Индекс герметичности (LI)

Требования к виду исполнения

Требования к утечке конкретных микроорганизмов не устанавливаются

Утечка конкретных микроорганизмов проверяется. Величина ее определяется в конкретных условиях

Утечка конкретных микроорганизмов проверяется при определенных условиях. Утечка должна быть ниже предела обнаружения или порогового значения

Основана на методе оценки утечки, проведенной в BATNEEC ("Наилучшая доступная техника, не вызывающая чрезмерных затрат")*.

Нормируемое пороговое значение основано на требуемом уровне безопасности и может являться, например, пределом обнаружения в соответствии с BATNEEC.

* Использование BATNEEC не означает, что вложение финансовых затрат снижает степень безопасности. Там, где доступны несколько методов, пользователь может выбрать самые подходящие, обеспечивающие необходимое качество.

5.2 Приспособленность к очистке

Виды исполнения боксов по критерию приспособленности к очистке представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Виды исполнения боксов по критерию приспособленности к очистке

Вид исполнения по критерию приспособленности к очистке. Индекс приспособленности к очистке (CI)

Требования к виду исполнения

Требования к видимым загрязнениям или чистоте не устанавливаются

Приспособленность к очистке установлена и проверена при определенных условиях или же бокс сконструирован с учетом особых технических требований

Приспособленность к очистке проверяется и оценивается при определенных условиях. Загрязнения должны быть ниже предела обнаружения или порогового значения

Нормируемое пороговое значение основано на требуемом уровне безопасности и может быть, например, пределом обнаружения в соответствии с BATNEEC.

Вид исполнения по критерию приспособленности к очистке для всех классов БМБ должен быть CI-B или выше.

Требования по приспособленности к очистке предъявляются для тех БМБ, в которых:

- наличие загрязнений может поставить под угрозу процесс стерилизации бокса в случае, когда стерилизующий агент может не проникнуть во все части бокса или если в некоторых местах бокса не достигается требуемая температура стерилизации;

- мероприятия по удалению загрязнений являются единственным способом удаления и инактивации микроорганизмов с целью обеспечить безопасность бокса без проведения каких-либо других процедур стерилизации или процессов инактивации.

5.3 Приспособленность к стерилизации

Виды исполнения боксов по критерию приспособленности к стерилизации представлены в таблице 3.

Таблица 3 - Виды исполнения боксов по критерию приспособленности к стерилизации

Вид исполнения по критерию приспособленности к стерилизации. Индекс приспособленности к стерилизации (SI)

Требования к виду исполнения

БМБ не пригоден или не испытан на возможность удержания конкретных микроорганизмов

БМБ может быть использован для удержания конкретных видов жизнеспособных микроорганизмов

БМБ может подвергаться стерилизации

Примечание - В данной таблице описан результат процедуры инактивации, а не способ и средства достижения результата.

5.2 Бокс биологической безопасности для микробиологических исследований

Бокс биологической безопасности для микробиологических исследований (далее бокс) - это рабочее помещение, оснащенное установкой для горизонтального и вертикального ламинарных потоков воздуха, предназначенной для удаления пыли и других частиц из воздуха, в том числе микробов.

Максимально допустимое количество частиц в кубическом метре с размером больше или равным 0,5 мкм представляет класс устранения пыли из защитного кабинета с очисткой воздуха. Для кабинетов, используемых в микробиологии пищевых продуктов, количество частиц не должно быть выше 4000 в кубическом метре.

Кабинеты для использования в лабораториях микробиологии пищевых продуктов разделяются на четыре типа:

а) Боксы биологической безопасности класса I - это открытые спереди безопасные вытяжные шкафы, защищающие оператора и окружающую среду, но не защищающие продукт от загрязнения извне.

Потенциально инфицированные аэрозоли будут циркулировать внутри бокса и затем поглощаться фильтром. Отфильтрованный воздух затем поступает в атмосферу: если этого не происходит, воздух должен пройти через два сухих воздушных фильтра (НЕРА), установленные последовательно. Боксы биологической безопасности класса I не допускаются для работы с микроорганизмами 2-й группы патогенности из-за трудностей в поддержании и обеспечении соответствующей безопасности оператора.

b) Боксы биологической безопасности класса II защищают образец, оператора и окружающую среду. В них профильтрованный воздух циркулирует а часть выделяется в атмосферу и заменяется воздухом через рабочее отверстие. Таким образом обеспечивается защита оператора. Эти боксы подходят для работы с патогенами 2-й группы патогенности.

c) Ламинарные боксы с горизонтальным оттоком воздуха защищают работу от загрязнения, но выносят любые аэрозоли на лицо оператора. Поэтому они не могут использоваться для работы с инокулируемыми культурами или для приготовления культуры ткани.

d) Ламинарные кабинеты с вертикальным потоком воздуха защищают продукт при помощи вертикального ламинарного потока воздуха, профильтрованного через фильтр НЕРА. Они также защищают оператора при помощи использования внутреннего рециркулированного воздуха. Они особенно подходят для обеспечения стерильной окружающей среды при работе со стерильными продуктами и для защиты оператора при работе с порошками.

Если это определено национальными регламентами, боксы биологической безопасности используют для любых видов работы с патогенными микроорганизмами и контаминированным и порошками.

В боксах биологической безопасности не допускается использовать газовые горелки или установки для сжигания отходов. 8 боксах применяют одноразовое оборудование (бактериологические петли, пипетки и т. д.)

Примечание - Газовую горелку применяют при условии создания маленького пламени таким образом, чтобы не нарушить поток воздуха.

В боксах биологической безопасности не допускается наличие оборудования, которое не применяется в работе.

Все необходимое размещают до начала работы внутри бокса, чтобы свести к минимуму количество движений рук внутри и вне рабочей зоны. Расположение оборудования и материалов должно быть таким, чтобы свести к минимуму нарушение потока воздуха в рабочей зоне.

Операторы должны быть обучены правильному использованию боксов, чтобы обеспечивать как их безопасность, так и сохранность образца или культуры микроорганизмов.

Рабочую зону очищают и обеззараживают после использования с помощью соответствующего, не обладающего коррозийными свойствами дезинфицирующего средства, руководствуясь инструкцией изготовителя. Регулярно обследуют защитные предфильтры проволочных сеток и вытирают их чистой, пропитанной дезинфицирующим средством тканью.

Для ламинарных шкафов с очисткой воздуха наружную часть фильтра необходимо регулярно очищать под вакуумом таким образом, чтобы не повредить фильтрующую среду.

Боксы биологической безопасности должны окуриваться перед заменой фильтра или плановым обслуживанием.

После очистки бокса для обеззараживания можно использовать ультрафиолетовые (УФ) лампы. УФ лампы регулярно очищают или заменяют в соответствии с инструкциями изготовителя.

Необходимо использовать боксы биологической безопасности, которые предназначены для применения в лаборатории е соответствии с существующей окружающей средой.

Квалифицированный оператор должен проверять эффективность бокса биологической безопасности при получении и затем с регулярными интервалами, как рекомендует изготовитель, а также после любого ремонта или модификации.

Следует периодически выполнять проверку чистоты рабочей поверхности и стен бокса от любого микробного загрязнения.

Необходимо периодически осуществлять проверку числа микроорганизмов, циркулирующих в воздухе во время работы фильтров, с помощью обычного оборудования. Например, экспонируя несколько открытых чашек Петри, содержащих неселективную агаровую культуральную среду (например РСА), в каждом кабинете в течение 30 мин. Допускается использовать другие методы.

специальные изолированные помещения, часть помещения или камеры, предназначенные для выполнения работ, требующих особой стерильности или безопасного пребывания людей. Различают: 1) больничные боксированные отделения или палаты, в к-рых изолируются инфекц. б-ные или б-ные с резко повышенной восприимчивостью к инфекциям, напр., во время супрессивной терапии; 2) герметические боксы-камеры, где проводятся работы с радиоактивными материалами; 3) микробиол. Б., используемые для работ с инфекц. (посевы, пересевы, разведения и др.) и стерильными (приготовление питательных сред, к-р тканей, разлив иммунных с-к и др.) материалами. В Б. должны быть созданы такие условия, к-рые, с одной стороны, исключали бы возможность лабораторного заражения сотрудников, а с другой - предупреждали контаминацию стерильных материалов микроорганизмами. В Б. одного типа люди находятся внутри рабочего помещения. Такие Б. представляют собой изолированные, обычно стеклянные части помещений площадью в 5 -10 м 2 . Пол, стены и двери Б. должны быть гладкими, без ниш, выступов, острых углов, щелей, швов, сделаны из материала, хорошо поддающегося мойке и дезинфекции. Оборудование: стол, табуреты, стеклянный шкаф для стерильных материалов, штативы, осветительные и бактерицидные лампы, подключение газа. Подводку воды и канализационный слив лучше делать в предбокснике. В современных Б. имеются система подачи стерильного воздуха или устройство для ламинарного потока воздуха, создающего высокую степень стерильности и безопасности. Перед началом и после работы делают влажную уборку и дезинфекцию Б., а также их облучение УФЛ. Воздух Б. систематически проверяют на обсемененность микробами. Для малых объемов работы предназначены переносные настольные Б. или Б.-столы, когда человек находится за пределами камеры Б. Лучшим вариантом таких Б. являются Б. с ламинарным потоком стерильного воздуха. См. Изоляторы.

Полезное

Смотреть что такое "Боксы" в других словарях:

БОКСЫ — (от англ. box ящик, стойло), название, даваемое части палаты, изолированной в виде стойла или клетки и образуемой устройством перегородок, отделяющих одного б ного от другого. Перегородки устраиваются подвижные, в виде ширм, или постоянные.… … Большая медицинская энциклопедия

БОКСЫ — (Boxes) особые стойла, представляющие собой деревянные, окованные снаружи железными полосами и обитые внутри войлоком и парусиной ящики с двумя дверцами. Служат для подъема на борт судна ценных лошадей (скаковых, цирковых). Самойлов К. И. Морской … Морской словарь

боксы микробиологической безопасности — Специальное ламинарное укрытие, бокс. Защитное устройство для обеспечения физического барьера между оператором и рабочим материалом. Служит для создания беспылевой воздушной среды. См. также Laminar flow hoods (ламинарные шкафы (и боксы)). [Англо … Справочник технического переводчика

ГОСТ Р ИСО 14644-7-2007: Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды. Часть 7. Изолирующие устройства (укрытия с чистым воздухом, боксы перчаточные, изоляторы и мини-окружения) — Терминология ГОСТ Р ИСО 14644 7 2007: Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды. Часть 7. Изолирующие устройства (укрытия с чистым воздухом, боксы перчаточные, изоляторы и мини окружения) оригинал документа: 3.4 барьер (barrier):… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

ламинарные шкафы (и боксы) — ЛШ лабораторные шкафы биологической безопасности ЛШББ ламинар Лабораторные шкафы биологической безопасности (ламинарные шкафы и боксы) разработаны, с целью защиты персонала лаборатории, окружающей среды и рабочих материалов [Англо русский… … Справочник технического переводчика

SOS-боксы — * SOS боксы * SOS boxes последовательности нуклеотидов, выполняющие функции операторов (см.) в ДНК E. coli, которые узнаются белком репрессором (см.) LexA. SOS б. контролируют экспрессию нескольких генов, вовлеченных в SOS репарацию (см.): recA,… … Генетика. Энциклопедический словарь

кэш-боксы — кэш боксы, кэш боксов … Орфографический словарь-справочник

Шкафы и боксы ламинарные — ламинарные шкафы и боксы оборудование, используемое для обеспечения физической изоляции выполняемых технологических операций, сопровождающихся образованием аэрозолей или других вредных агентов, которое действует в качестве барьера, препятствуя их … Официальная терминология

Бокс микробиологической безопасности (БМБ) - вентилируемое ограниченное пространство, предназначенное для обеспечения защиты оператора и окружающей среды от аэрозолей, возникающих вследствие работ с потенциально опасными и опасными микроорганизмами, с помощью удаления воздуха в атмосферу путём фильтрации.

Каждый бокс должен быть сконструирован таким образом, чтобы воздух, удаляемый из бокса, был очищен высокоэффективными воздушными фильтрами типа НЕРА / ULPA класса не ниже H14 по ГОСТ Р ЕН 1822-1-2010. Бокс должен соответствовать требованиям стандарта ГОСТ Р ЕН 12469-2010 "Биотехнология. Технические требования к боксам микробиологической безопасности".

БМБ класса I: БМБ с рабочим проёмом, через который оператор может проводить манипуляции внутри бокса. Бокс должен быть сконструирован таким образом, чтобы обеспечить защиту оператора от выброса диспергированных контаминированных частиц, образовавшихся внутри бокса. Это достигается с помощью направленного внутрь бокса через рабочий проем воздушного потока с последующей его фильтрацией и удалением из бокса. Перечень эксплуатационных характеристик БМБ I класса приведён в таблице 10.1.

Таблица 10.1 - Эксплуатационные характеристики БМБ I класса

БМБ класса II: БМБ с рабочим проёмом, через который оператор может проводить манипуляции внутри бокса. Бокс должен быть сконструирован таким образом, чтобы оператор был защищен, риск загрязнения продукта и перекрёстного загрязнения низок, а удаление возникающих загрязнений обеспечивалось с помощью профильтрованного воздушного потока, циркулирующего внутри бокса, а также с помощью фильтрации удаляемого из бокса воздуха. Перечень эксплуатационных характеристик БМБ II класса приведён в Таблице 10.2.

БМБ II класса с рециркуляцией (тип А2) - боксы, в которых нисходящий поток, прошедший через фильтр, является частью (обычно 70%) общего потока воздуха, проходящего через воздуховоды бокса. Выходящий воздух, прошедший через выпускной фильтр, может выбрасываться обратно в помещение установки или в вытяжной воздуховод. В боксах данного типа внутренние воздуховоды, по которым проходит загрязнённый воздух с повышенным давлением, должны быть окружены воздуховодами с пониженным давлением воздуха.

БМБ II класса без рециркуляции (тип В2) - боксы, в которых нисходящий поток, прошедший через фильтр, полностью состоит из воздуха, забираемого из помещения. Весь поток воздуха, прошедший через камеру бокса, выбрасывается в атмосферу через фильтры без рециркуляции в боксе и помещении установки. В боксах данного типа внутренние воздуховоды, по которым проходит загрязнённый воздух с повышенным давлением, должны быть окружены воздуховодами с пониженным давлением воздуха.

Таблица 10.2- Эксплуатационные характеристики БМБ II класса

БМБ класса III: бокс микробиологической безопасности, в котором рабочая зона полностью изолирована, а оператор отделен от рабочего места физическим барьером (перчатки механически соединены с боксом). Профильтрованный воздух постоянно поступает в бокс, а удаляемый из БМБ воздух фильтруется для предотвращения попадания микроорганизмов в окружающую среду. Перечень эксплуатационных характеристик БМБ III класса приведён в таблице 10.3.

Таблица 10.3 Эксплуатационные характеристики БМБ III класса

Характеристика	Критерий соответствия
Удельный расход входящего потока воздуха (Q)	Не менее 0,05 на 1 объёма бокса
Средняя скорость входящего потока через перчаточный порт при одной снятой перчатке	Не менее 0,70 м/с
Защитная эффективность фильтра	Соответствие методике контроля
Разряжение в рабочей камере бокса	Не менее 200 Па по отношению к помещению лаборатории

Примечание - допускается применение боксов микробиологической безопасности не соответствующих требованиям настоящего приложения в случае документально подтверждённого введения их в эксплуатацию до вступления в силу настоящих СП.

Читайте также: